Co-IP 是研究蛋白:蛋白相互作用的常用方法,其使用抗体对抗原(诱饵蛋白)进行免疫沉淀,对任何相互作用蛋白(猎物蛋白)进行免疫共沉淀。使用蛋白 A 或 G 的传统 co-IP 方法可导致抗体重链和轻链的共洗脱,而这些重链和轻链可能与相关条带共迁移,掩盖了重要的结果。Pierce Co-IP 试剂盒通过将抗体共价偶联至胺反应性树脂上,解决了该问题。该试剂盒包含用于蛋白结合和回收的优化缓冲液、进行对照实验所需的试剂以及高效离心柱和收集管,可缩短方案并尽量减少操作和混合。
免疫共沉淀试剂盒的特点:
•适用于任何纯化抗体—使用任何纯化抗体进行 co-IP 实验,无论物种或 Ig 类别(鸡 IgY、人 IgE、小鼠 IgG1、IgM 等)如何;不依赖蛋白 A 和蛋白 G 的亲和结合 • 无抗体干扰—共价结合方法和非还原洗脱系统可以产生纯 co-IP 产品,该产品不会被 IP 抗体污染 • 可重复使用的抗体微珠—共价抗体固定化允许重复使用制备的 IP 树脂,并可能节省昂贵抗体 • 全套试剂盒—所有用于抗体固定和许多 IP 实验的试剂,包括结合和洗涤缓冲液、洗脱缓冲液和便利的微量离心柱,使树脂操作更加简单和高效。 •随附对照微珠—提供未衍生化琼脂糖微珠,用作非特异性结合的阴性对照 • 通用—co-IP 方法与任何生理(非变性)蛋白样品缓冲液兼容,缓冲液与特异性抗体抗原和蛋白相互作用复合物兼容。
免疫共沉淀 (Co-IP) 是一种用于发现蛋白相互作用的常用体外方法。Pierce 免疫共沉淀试剂盒经过配置,是有效进行 Co-IP 实验的基本工具,能够产生不含棘手的 IP 抗体的纯 IP 和 co-IP 产物。通过使用可直接且永久偶联纯 IP 抗体的 AminoLink Plus 树脂替代蛋白 A/G 琼脂糖微珠,对传统 co-IP 技术实现这种改善。温和(非还原、非变性)洗脱缓冲液可实现在保留琼脂糖微珠上固定化抗体的同时解离 IP 靶标。结果是获得一种可通过 Western 印迹(或甚至测序)进行分析的纯产物,无抗体干扰。
除消除 IP 抗体污染外,构成 Pierce Co-IP 试剂盒的抗体偶联方法还可避免传统蛋白 A 和蛋白 G 方法产生的非特异性结合相互作用和浸出污染。尽管偶联方法要求起始抗体包含在不含 BSA、明胶和其他贮藏蛋白稳定剂的无胺缓冲液中,但其不依赖于蛋白 A 或蛋白 G 这一事实意味着任何抗体种类或类别均可用于 IP(例如,IgM 和鸡 IgY)。实际上,任何纯化的蛋白都可以固定化用于结合配偶体的亲和纯化。
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.
规格
检测
亲和纯化
适用于(设备)
微型离心机
产品线
Pierce™
数量
1 个试剂盒
适用于(应用)
免疫沉淀(IP)
靶标
无靶标特异性
类型
免疫沉淀试剂盒
足够用于
50 次反应
产品规格
试剂盒
内容与储存
足够用于:准备并进行 50 次 co-IP 反应,每次使用 25 μL 树脂 • AminoLink Plus 偶联树脂,2 mL • 偶联缓冲液 (20X),25 mL • 氰基硼氢化钠溶液 (5M),0.5 mL • 淬灭缓冲液,50 mL • 洗涤液,60 mL • IP 裂解/洗涤缓冲液,2 x 50 mL • 改良 Dulbecco PBS (20X),25 mL • 调节缓冲液 (100X),5 mL • 洗脱缓冲液,50 mL • 泳道标志物样品缓冲液 (5X),5 mL • Pierce 离心柱,螺旋盖,50 根柱 • 微量离心机收集管,2 mL,100 支管 • 微量离心机收集管,1.5 mL,50 支管 • Pierce 对照琼脂糖树脂,2 mL