Spectra™ Multicolor High Range Protein Ladder

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Thermo Scientific™

Spectra™ Multicolor High Range Protein Ladder

Thermo Scientific Spectra Multicolor High Range Protein Ladder is a mixture of eight blue-, green-, and orange-stained proteins (40 to了解更多信息

货号	数量
26625	2 x 250μL

货号 26625

价格（CNY)

1,274.00

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2 x 250μL

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Thermo Scientific Spectra Multicolor High Range Protein Ladder is a mixture of eight blue-, green-, and orange-stained proteins (40 to 300 kDa) for use as size standards for high-MW proteins in gel electrophoresis and western blotting. The protein ladder is supplied in a ready-to-use format for direct loading onto gels; no need to heat, reduce, or add sample buffer prior to use.

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Applications
• Monitoring of protein migration during SDS-PAGE
• Verifying western transfer efficiency
• Approximate sizing of proteins on SDS-polyacrylamide gels and western blots
• Locating a protein of interest for excision from an unstained preparative gel

仅供科研使用。不可用于诊断程序。

检测方法比色法、NIR 荧光 (700 nm)、RGB 荧光 (555 nm)

适用于（应用）Tris-acetate gels

凝胶兼容性Bolt™ Bis-Tris Plus 凝胶、Novex™ Tricine 凝胶、Novex™ Tris-甘氨酸凝胶、NuPAGE™ Bis-Tris 凝胶、NuPAGE™ Tris-醋酸盐凝胶、SDS-PAGE 凝胶

分子量300、250、180、130、100、70、50、40 kDa

产品线Spectra™

产品类型蛋白分子量标准品

数量2 x 250μL

推荐应用Tris-醋酸盐凝胶

运输条件经批准可置于湿冰或干冰上运输

染色剂类型3 色：蓝色、橙色、绿色

系统类型Western 印迹，SDS-PAGE

标记物数量8

大小范围40-300 kDa

Unit SizeEach

内容与储存

内容物:两小瓶,250 μL/瓶

储存缓冲液:62.5 mM Tris-H₃PO₄(25°C 下 pH 值 7.5)、1 mM EDTA、2% SDS、10 mM DTT、1 mM NaN₃ 和 33% 甘油

储存:接收后,在 -20°C 下储存

常见问题解答 (FAQ)

我使用了你们的一种Thermo Scientific Spectra预染蛋白质分子量标准品进行转印，但是膜上的转印效果较差。可能出了什么问题？

以下是一些可能的原因和解决方案：

- 凝胶上的分子量标准品的量不足：将适当体积的分子量标准品上样到凝胶上。以下是我们的建议：
•小型凝胶：每孔5μL（厚度0.75-1.0 mm）或每孔10μL（厚度1.5 mm）
•大凝胶：每孔10μL（厚度0.75-1.0 mm）或每孔20μL（厚度1.5 mm）

- 转印不完全或不理想：优化转印条件

我使用了你们的一种Thermo Scientific Spectra 预染蛋白质分子量标准品，这些条带没有很好地分离。可能是什么原因造成的？

以下是一些可能的原因和解决方案：

- 样品被煮沸：丢弃煮沸的等分样品。
- 使用的分子量标准品体积过大：使用前加入较少的体积或稀释蛋白质上样缓冲液中的分子量标准品。

我使用了你们的一种预染蛋白质标准品进行转印，发现在转印过程中条带在膜上褪色了。为什么会这样？

褪色最可能是由于封闭/洗涤液中的洗涤剂将一些蛋白质从膜上洗脱造成的。染料本身不会从蛋白质上洗脱，因为它们是共价结合的。我们已经发现较小孔径的膜可以在封闭和洗涤过程中更好地保留蛋白质，因此，为了获得绝佳的分辨率和蛋白质保留率，推荐使用0.2 µm代替0.45 µm的膜。转印后，可以用铅笔在膜上圈出预染条带，从而在封闭和处理后仍可辨认条带位置。

我使用了你们的一种蛋白质标准品进行转印，发现一些小分子蛋白质条带穿过了膜。我该如何解决这个问题？

•降低电压、电流或缩短转印时间
•确保转膜缓冲液的甲醇浓度合适；可使用浓度为10–20%的甲醇，从而去除SDS-蛋白质复合物中的SDS，并促进蛋白质与膜的结合。
•确保转膜缓冲液的SDS浓度合适（若加入了SDS），SDS浓度不要超过0.02–0.04%。过多的SDS会阻碍蛋白质与膜的结合。过多的SDS会阻碍蛋白质与膜的结合。
•检查膜的孔径和靶标蛋白质的大小。小于10kDa的蛋白质很容易穿过0.45μm孔径的膜。如果您的目标蛋白质小于10 kDa，那么最好使用0.2μm孔径的膜。

我使用了你们的一种蛋白质标准品进行转印，发现一些高分子蛋白质条带转印到膜上的效果很差。可以提供一些提示吗？

•增加电压、电流或转印时间
•凝胶和SDS-蛋白质复合物中的SDS会促进蛋白质从凝胶中洗脱，但抑制蛋白质与膜的结合。这种抑制作用在硝化纤维素膜上的强度大于PVDF膜。对于难以从凝胶中洗脱的蛋白质，如大分子量蛋白质，可在转膜缓冲液中加入少量SDS以改善转印效果。我们建议在组装三明治前将凝胶置于含0.02–0.04% SDS的2x转膜缓冲液（无甲醇）中预平衡10分钟，然后使用含10%甲醇和0.01% SDS的1X转膜缓冲液进行转印。
•甲醇可去除SDS-蛋白质复合物中的SDS，促进蛋白质与膜的结合，但对凝胶本身有一些不良影响，会降低转印效率。甲醇可能导致孔径减小、某些蛋白质发生沉淀以及一些碱性蛋白质带正电荷或变为中性。应确保转膜缓冲液的甲醇浓度不高于10–20%，并使用高质量的分析级甲醇。

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