PageRuler™ Unstained Low Range Protein Ladder
Thermo Scientific™

PageRuler™ Unstained Low Range Protein Ladder

Thermo Scientific PageRuler Unstained Low Range Protein Ladder is a mixture of eight purified proteins and peptides (3.4 to 100 kDa) for use as size standards in peptide and small-protein gel electrophoresis.
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货号数量
266322 x 250μL
货号 26632
价格(CNY)
493.00
Each
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Thermo Scientific™ PageRuler Unstained Low Range Protein Ladder is a mixture of eight (8) purified proteins and peptides (3.4 to 100kDa) for use as size standards in peptide and small protein gel electrophoresis.

Thermo Scientific PageRuler Unstained Low Range Protein Ladder is a mixture of eight purified proteins and peptides (3.4 to 100 kDa) for use as size standards in peptide and small-protein gel electrophoresis. The protein ladder is supplied in a ready-to-use format for direct loading onto gels; no need to heat, reduce, or add sample buffer prior to use.

Product features

  • Reference bands—25 kDa band is stronger than the others for easy orientation
  • Tagged—the ladder proteins (except for the 5 and 3.4 kDa peptides) contains an integral Strep-tag™ II sequence and can be detected on western blots using Strep-Tactin™ conjugates

Applications

  • Accurate protein sizing on SDS-polyacrylamide gels and western blots
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
适用于(应用)Tricine gels
凝胶兼容性Bolt™ Bis-Tris Plus 凝胶、Novex™ Tricine 凝胶、Novex™ Tris-甘氨酸凝胶、NuPAGE™ Bis-Tris 凝胶、NuPAGE™ Tris-醋酸盐凝胶、SDS-PAGE 凝胶
分子量100、30、25、20、15、10、5、3.4 kDa
数量2 x 250μL
即用型
推荐应用Tricine 凝胶
运输条件经批准可置于湿冰或干冰上运输
标记物数量8
产品线PageRuler
产品类型蛋白分子量标准品
大小范围3.4-100 kDa
染色剂类型非预染蛋白Marker
系统类型Western 印迹,SDS-PAGE
Unit SizeEach
内容与储存
内容物:两小瓶,250 μL/瓶

储存缓冲液:62.5 mM Tris-H3PO4(25°C 下 pH 值 7.5)、1 mM EDTA、2% SDS、100 mM DTT、1 mM NaN3、0.01% 溴酚蓝和 33% 甘油

储存:接收后,在 -20°C 下储存

常见问题解答 (FAQ)

我使用了你们的一种Thermo Scientific PageRuler 非预染蛋白质分子量标准品,这些条带没有很好地分离。可能是什么原因造成的?

以下是一些可能的原因和解决方案:

- 样品被煮沸: 丢弃煮沸的样品。
- 使用的分子量标准品体积过大:加入较少的体积或使用前用蛋白质上样缓冲液稀释分子量标准品。
- 储存缓冲液中的DTT氧化:加入新制备的DTT溶液使最终浓度达到100mM。

我使用了你们的一种蛋白质标准品进行转印,发现一些小分子蛋白质条带穿过了膜。我该如何解决这个问题?

•降低电压、电流或缩短转印时间
•确保转膜缓冲液的甲醇浓度合适;可使用浓度为10–20%的甲醇,从而去除SDS-蛋白质复合物中的SDS,并促进蛋白质与膜的结合。
•确保转膜缓冲液的SDS浓度合适(若加入了SDS),SDS浓度不要超过0.02–0.04%。过多的SDS会阻碍蛋白质与膜的结合。过多的SDS会阻碍蛋白质与膜的结合。
•检查膜的孔径和靶标蛋白质的大小。小于10kDa的蛋白质很容易穿过0.45μm孔径的膜。如果您的目标蛋白质小于10 kDa,那么最好使用0.2μm孔径的膜。

我使用了你们的一种蛋白质标准品进行转印,发现一些高分子蛋白质条带转印到膜上的效果很差。可以提供一些提示吗?

•增加电压、电流或转印时间
•凝胶和SDS-蛋白质复合物中的SDS会促进蛋白质从凝胶中洗脱,但抑制蛋白质与膜的结合。这种抑制作用在硝化纤维素膜上的强度大于PVDF膜。对于难以从凝胶中洗脱的蛋白质,如大分子量蛋白质,可在转膜缓冲液中加入少量SDS以改善转印效果。我们建议在组装三明治前将凝胶置于含0.02–0.04% SDS的2x转膜缓冲液(无甲醇)中预平衡10分钟,然后使用含10%甲醇和0.01% SDS的1X转膜缓冲液进行转印。
•甲醇可去除SDS-蛋白质复合物中的SDS,促进蛋白质与膜的结合,但对凝胶本身有一些不良影响,会降低转印效率。甲醇可能导致孔径减小、某些蛋白质发生沉淀以及一些碱性蛋白质带正电荷或变为中性。应确保转膜缓冲液的甲醇浓度不高于10–20%,并使用高质量的分析级甲醇。

我在Tris-甘氨酸凝胶上使用了一种预染标准品,发现蛋白质的分子量与在NuPAGE Bis-Tris凝胶上的分子量不同。这是什么原因?

预染标准品具有与每种蛋白质共价结合的染料,这将导致标准品在不同的缓冲系统(即不同的凝胶)中迁移率不同。因此,使用预染标准品进行分子量估算将仅得出蛋白质的表观分子量。预染标准品可用于分子量估算、确认凝胶迁移和估算转膜效率,但对于需要精确估算分子量的应用,应使用非预染标准品。

我使用了你们的一种蛋白质标准品,并在泳道中看到了一些额外的条带。可以提供一些建议吗?

•上样时,请注意确保相邻样品泳道没有交叉污染。
•确保每个泳道上标准品的量都是正确的。蛋白质上样过多会导致产生额外的条带,这个问题在使用银染凝胶时尤为突出。
•标准品储存不当或反复冻融会导致蛋白质降解。