Cells-to-CT™ 大包装裂解试剂
Cells-to-C<sub>T</sub>&trade; 大包装裂解试剂
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Cells-to-CT™ 大包装裂解试剂

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Cells-to-CT™ 散装裂解试剂是 TaqMan™ Gene Expression Cells-to-CT™ 试剂盒的组成部分，若需要体积大于随试剂盒提供的体积，可单独购买。所含试剂包括：裂解液、终止液和 DNase了解更多信息
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货号数量
4391851C2,500 reactions
货号 4391851C
价格（CNY)
158,170.00
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2,500 reactions
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Cells-to-CT™ 散装裂解试剂是 TaqMan™ Gene Expression Cells-to-CT™ 试剂盒的组成部分，若需要体积大于随试剂盒提供的体积，可单独购买。所含试剂包括：裂解液、终止液和 DNase。TaqMan™ Gene Expression Cells-to-CT™ 试剂盒使研究人员可以使用培养细胞轻松地进行表达分析，无需纯化 RNA。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
环保功能所用资源更少、废弃物更少、危害更少
反应次数2500 reactions
产品线Cells-to-CT
产品类型细胞裂解缓冲液
数量2,500 reactions
运输条件干冰
Unit SizeEach
内容与储存
该试剂盒包含以下组成部分：
裂解液 (124 mL)：储存于 4°C 条件下
终止液 (12.5 mL)：储存于 -20°C 条件下
DNase (1.25 mL)：在 -20°C 下储存

常见问题解答 (FAQ)

完成Cells-to-CT实验后，在没有反转录的阴性对照中出现PCR产物。这表示什么？

如果在没有反转录的阴性对照反应中出现PCR产物，而非无模板对照中，则表示RNA样品中仍存在基因组DNA，并且在实时PCR中扩增了基因组DNA。请参考以下建议：

•确保DNase I完全混入裂解液中。
•减少每次裂解反应的细胞用量。
•使用室温下的裂解液裂解细胞，确保裂解反应在室温下发生。

也可尝试延长裂解反应的孵育时间至8分钟，和/或使用已经升温至25°C的裂解液裂解细胞。

完成Cells-to-CT实验后，在无模板PCR对照中出现PCR产物。可能有哪些原因？

在无模板PCR对照中出现PCR产物，表示存在DNA污染。为控制污染，需要采取更为严格的步骤。

进行了Cells-to-CT实验之后我没获得PCR产物或获得了预期之外的PCR产物。可能有哪些原因？

请查看以下可能原因和建议：

•加入和混合终止液出现问题：确保将终止液直接加入到裂解物中。如果裂解液的成分未完全灭活，可能会抑制RT-PCR。
•RNA发生降解：开始细胞裂解步骤前，将细胞保存在PBS中并置于冰上。
•样品中的RNase未完全灭活：可能使用了过多细胞或细胞中加入过多PBS，稀释了裂解液。
•样品在恢复到室温前放置太久：加入终止液后，不要将裂解物放置在室温超过20分钟。
•样品不含目标RNA：通过使用样品中的XenoRNAControl确认操作流程是否正常。同时，应确认PCR引物能够在您所使用的PCR条件下扩增目标分子。

Cells-to-CT实验中的终止液用完了。能否单独购买？

可以，该产品具有1mL分装形式（货号 4402960）。

我的Cells-to-CT反应中有基因组DNA污染，该如何除去污染？

1.确保从孔中移去了所有培养基。
2.移去培养基后，使用相同体积的室温1X PBS洗涤。
3.确保反应在室温下发生（如果将反应板置于冰上、将反应板快速转移至实验台或使用了冰冷的裂解液，则裂解反应可能不会达到室温）。
4.将裂解液恢复至室温后，再加入到细胞。
5.使裂解反应在25°C下持续8分钟。

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引用和文献 (3)

引用和文献
Abstract
Genome-wide siRNA-based functional genomics of pigmentation identifies novel genes and pathways that impact melanogenesis in human cells.
Authors:Ganesan AK, Ho H, Bodemann B, Petersen S, Aruri J, Koshy S, Richardson Z, Le LQ, Krasieva T, Roth MG, Farmer P, White MA,
Journal:PLoS Genet
PubMed ID:19057677
'Melanin protects the skin and eyes from the harmful effects of UV irradiation, protects neural cells from toxic insults, and is required for sound conduction in the inner ear. Aberrant regulation of melanogenesis underlies skin disorders (melasma and vitiligo), neurologic disorders (Parkinson''s disease), auditory disorders (Waardenburg''s syndrome), and opthalmologic disorders ... More
N-methylpurine DNA glycosylase and DNA polymerase beta modulate BER inhibitor potentiation of glioma cells to temozolomide.
Authors:Tang JB, Svilar D, Trivedi RN, Wang XH, Goellner EM, Moore B, Hamilton RL, Banze LA, Brown AR, Sobol RW,
Journal:Neuro Oncol
PubMed ID:21377995
'Temozolomide (TMZ) is the preferred chemotherapeutic agent in the treatment of glioma following surgical resection and/or radiation. Resistance to TMZ is attributed to efficient repair and/or tolerance of TMZ-induced DNA lesions. The majority of the TMZ-induced DNA base adducts are repaired by the base excision repair (BER) pathway and therefore ... More
Accurate RT-qPCR gene expression analysis on cell culture lysates.
Authors:Van Peer G, Mestdagh P, Vandesompele J,
Journal:Sci Rep
PubMed ID:22355736
'Gene expression quantification on cultured cells using the reverse transcription quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) typically involves an RNA purification step that limits sample processing throughput and precludes parallel analysis of large numbers of samples. An approach in which cDNA synthesis is carried out on crude cell lysates instead of ... More