AmpliTaq Gold™ 360 DNA 聚合酶
AmpliTaq Gold™ 360 DNA 聚合酶
Applied Biosystems™

AmpliTaq Gold™ 360 DNA 聚合酶

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当与改进的 AmpliTaq Gold 360 缓冲液和可选的 360 GC 增强剂配合使用时,Applied Biosystems™ AmpliTaq Gold™ 360 DNA 聚合酶可扩增大范围的 DNA 序列。AmpliTaq Gold™ 360 DNA 聚合酶可360°涵盖所有靶标。
** 针对极广泛的靶标进行优化 — 从常规到复杂
* 无与伦比的灵敏度、特异性和得率
* 可使用市场领先的 360 GC 增强剂对高 GC 含量的序列进行稳健扩增
* 获得极高质量的测序数据

针对简单及复杂靶标进行优化

复杂靶标包括高 AT 含量、高 GC 含量、引物二聚体形成扩增子、均聚物重复序列以及构成测序挑战的扩增子。之前需要特殊酶和反应条件的扩增子现在可以在标准条件下用单一试剂重复扩增(图1)。在超过40组扩增子间具有竞争力的基准检测结果使得 AmpliTaq Gold 360™ 成为表现极佳的酶,可确保针对常规和复杂靶标都能获得极高的扩增成功率(表1)。
如图1所示,高 GC 含量的区域在采用竞品 DNA 聚合酶和原 AmpliTaq Gold 时扩增能力极差,而 AmpliTaq Gold 360 可实现成功且稳定的扩增。

针对热启动 PCR 进行优化

AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶可提供与 AmpliTaq Gold DNA 聚合酶相同的热启动特异性。高温孵育步骤对于 AmpliTaq Gold DNA 聚合酶活化必不可少,同时可确保仅在 DNA 完全变性且引物未退火的温度下才具有酶活性。
聚合酶室温加入反应混合物时,酶尚未激活,不会发生引物延伸。任何可能已经发生的低严格度错误引发事件都不会促使酶延伸,也不会促使酶扩增。因此,PCR 实验可以在室温下进行,而不用担心在错误引发的位置延伸。AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶量在反应中会随着每次循环缓慢增加,并且特异性产物得率也会增加,但非特异性产物(包括引物二聚体)并不会发生积聚。图1显示了对广泛靶标的极高特异性,并总结于图2。其优异的特异性使得多通路检测和等位基因区分变得更为轻松。
AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶量在反应中会随着每次循环缓慢增加,并且特异性产物得率也会增加,但非特异性产物(包括引物二聚体)并不会发生积聚。图1显示了对广泛靶标的极高特异性,图 2A 与 B 对此进行了总结。其优异的特异性使得多通路检测和等位基因区分变得更为轻松。

出色的灵敏度和扩增长度

与原 AmpliTaq Gold™ DNA 聚合酶相比,AmpliTaq Gold™ 360 DNA 聚合酶通过一步额外的专利分离过程纯化所得,可消除来自酶制备过程的细菌 DNA 序列污染。当与增强型 360 Gold 缓冲液配合使用时,这种超纯酶除具有热启动功能外,还可减少假阳性结果、扩增低浓度靶序列,包括细菌和人类基因组等各种模板扩增。
AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶可以有效地扩增低拷贝数的靶标(图3),即使存在高浓度的复合 DNA,因此特别适用于低拷贝病原体检测,以及从降解的 DNA 样品中扩增靶标。超纯酶带来了无与伦比的灵敏度。AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶可高效、可重复地扩增长(长达 5 Kb)序列。图4显示了长片段人类和质粒 DNA 的稳健 PCR 扩增。
 

注释:

有关有限标签许可和商标信息,请参阅用户手册或产品说明书。
仅供研究使用。不适用于诊断用途。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
外切核酸酶活性5' - 3'
保真度(相对于 Taq)1 X
产品规格管装
环保功能绿色可持续包装
热启动内置热启动
反应次数800 Reactions
突出端3'-A
聚合酶AmpliTaq Gold 360 DNA Polymerase
产品类型DNA 聚合酶
数量1000 单位
反应形式分离组分
运输条件经批准可在室温下或置于湿冰上运输
尺寸(最终产品)5 kb或更小
原始材料DNA
最大浓度5 U/μL
适用于(应用)Hot-start PCR
高 GC PCR 扩增效果
反应速度标准
Unit SizeEach
内容与储存
• 1 x 1000 U AmpliTaq Gold 360 DNA 聚合酶
• 4 x 1.5 mL AmpliTaq Gold 360 缓冲液,10X
• 4 x 1.5 mL 25 mM MgCl2
• 4 x 1.5 mL 360 GC 增强剂

在 -15 至 -25°C 下储存。

常见问题解答 (FAQ)

当我用凝胶电泳检测时,我的寡核苷酸似乎没有显示出正确长度。这是为什么?

寡核苷酸应该在含有7M尿素的聚丙烯酰胺凝胶上检测,并且应该与50%的甲酰胺溶液一起上样以避免压缩和形成二级结构。长度相同但是组成不同的寡核苷酸可以产生不同的电泳结果。dC的迁移最快,其次是dA、dT,最慢的是dG。带有核糖核酸的寡核苷酸容易产生模糊的电泳条带,并且通常存在二级结构问题。

我所使用的引物刚开始时可以用来做PCR的,但是随着时间的推移它失效了。这是什么情况?

在进行PCR之前应将引物按单次使用的量分装。将分装的引物在94度下加热1分钟。在加入PCR反应体系前快速在冰上冷却引物。有些引物可能会自己退火或者自己蜷缩起来。

在我定制的寡核苷酸管中没有看到沉淀。我是否应该要求换货?

引物的干燥方法会使其附在管壁上形成一个薄层而不是附在底部,因此并不是总能看到沉淀,这种情况下产品仍可以正常使用。

在我的寡核苷酸管子底部有球状的沉淀。这是什么?我的寡核苷酸还能再用吗?

如果寡核苷酸受热过度,它看上去就像一个“球”状沉淀附在管子的底部。这应该不会影响到寡核苷酸的质量,并且该寡核苷酸应该是易溶于水的。

我的冻干寡核苷酸是绿色的。还能再用吗?

如果寡核苷酸看上去是绿色的,最有可能是墨水落入离心管中。该寡核苷酸应仍然是具有功能的。您可通过乙醇沉淀法去除该颜色。