SYBR™ Green Cells-to-CT™ 对照试剂盒
SYBR&trade; Green Cells-to-C<sub>T</sub>&trade; 对照试剂盒
Invitrogen™

SYBR™ Green Cells-to-CT™ 对照试剂盒

Green features
该试剂盒设计用于 Power SYBR™ Green(SKU# 4402953、4402954 和 4402955)和了解更多信息
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货号数量
4402959100 次反应
货号 4402959
价格(CNY)
4,507.00
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数量:
100 次反应
价格(CNY)
4,507.00
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该试剂盒设计用于 Power SYBR™ Green(SKU# 4402953、4402954 和 4402955)和 Fast SYBR™ Green Cells-to-CT™ 试剂盒(SKU# 4402956 和 4402957)。提供足以进行 100 次反应的试剂。其包括 Xeno™ RNA 对照品、合成 RNA 转录本(具有与当前带注释的生物序列缺乏同源性的独特序列)和 Xeno™ RNA 对照靶标的 PCR 引物集。它还包括用于高表达内源参照基因 β-肌动蛋白 (ACTB) 的 PCR 引物集。这些试剂共同为逆转录和基于 SYBR™ Green 的实时荧光定量 PCR 提供阳性对照,并可表明任何逆转录或 PCR 抑制剂的存在情况。使用 SYBR™ ACTB 引物的实时 RT-PCR 也可提供样品标准化内源对照品,以及在每次裂解超过 100 个细胞的样品的实验中确认足够的细胞输入。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
控制模板XenoRNA™ 对照品(合成 RNA 转录本)
产品规格管装
基因符号ACTB
环保功能所用资源更少、废弃物更少、危害更小
反应次数100 次反应
产品线Cells-to-CT™、SYBR™
数量100 次反应
运输条件干冰
靶标XenoRNA™ 对照品、β-肌动蛋白
标签或染料未偶联
Unit SizeEach
内容与储存
组分:

100 µL Xeno™ RNA 对照品,10^5 个拷贝/µL

250 µL 20X SYBR Xeno 引物

250 µL 20X SYBR ACTB 引物



量:

Xeno RNA 对照品:约 100 次裂解反应

SYBR Xeno 和 SYBR ACTB 引物:各最多 250 次 PCR (20 µL)




储存条件:保存于 −20°C 。请勿将其储存在自动除霜冷冻冰箱中。

常见问题解答 (FAQ)

完成Cells-to-CT实验后,在没有反转录的阴性对照中出现PCR产物。这表示什么?

如果在没有反转录的阴性对照反应中出现PCR产物,而非无模板对照中,则表示RNA样品中仍存在基因组DNA,并且在实时PCR中扩增了基因组DNA。请参考以下建议:

•确保DNase I完全混入裂解液中。
•减少每次裂解反应的细胞用量。
•使用室温下的裂解液裂解细胞,确保裂解反应在室温下发生。

也可尝试延长裂解反应的孵育时间至8分钟,和/或使用已经升温至25°C的裂解液裂解细胞。

完成Cells-to-CT实验后,在无模板PCR对照中出现PCR产物。可能有哪些原因?

在无模板PCR对照中出现PCR产物,表示存在DNA污染。为控制污染,需要采取更为严格的步骤。

进行了Cells-to-CT实验之后我没获得PCR产物或获得了预期之外的PCR产物。可能有哪些原因?

请查看以下可能原因和建议:

•加入和混合终止液出现问题:确保将终止液直接加入到裂解物中。如果裂解液的成分未完全灭活,可能会抑制RT-PCR。
•RNA发生降解:开始细胞裂解步骤前,将细胞保存在PBS中并置于冰上。
•样品中的RNase未完全灭活:可能使用了过多细胞或细胞中加入过多PBS,稀释了裂解液。
•样品在恢复到室温前放置太久:加入终止液后,不要将裂解物放置在室温超过20分钟。
•样品不含目标RNA:通过使用样品中的XenoRNAControl确认操作流程是否正常。同时,应确认PCR引物能够在您所使用的PCR条件下扩增目标分子。

Cells-to-CT实验中的终止液用完了。能否单独购买?

可以,该产品具有1mL分装形式(货号 4402960)。

我的Cells-to-CT反应中有基因组DNA污染,该如何除去污染?

1.确保从孔中移去了所有培养基。
2.移去培养基后,使用相同体积的室温1X PBS洗涤。
3.确保反应在室温下发生(如果将反应板置于冰上、将反应板快速转移至实验台或使用了冰冷的裂解液,则裂解反应可能不会达到室温)。
4.将裂解液恢复至室温后,再加入到细胞。
5.使裂解反应在25°C下持续8分钟。