mirVana™ miRNA 模拟物、miR-1 阳性对照

使用TaqMan miRNA Assay，您可以测定感兴趣的miRNA的水平。如果miRNA与转染进细胞的anti-miR和/或mirVana抑制物相结合，那么miRNA将不会被检测到，证明miRNA的有效失活。请注意，这仅适用于当提取的总RNA样本在加入RT引物时没有进行热变性的情况，因为热变性将导致复合体解体，这样即使细胞已被正确的转染，TaqMan miRNA Assay将仍能检测到miRNA。更多细节请参考TaqMan MicroRNA Cells-to-CT试剂盒（货号4391848）的实验方案。

模拟物和抑制物可以使用和siRNA相同的参数通过转染或电转进入细胞。

使用mirVana miRNA模拟物

为了后续应用，请使用一种对于您感兴趣的miRNA表达相对较低的细胞系。
• 转染时的细胞密度通常建议30–70%汇合度。
• 转染方法（传统转染或反式转染）。
• 细胞暴露于转染试剂-RNA寡核苷酸复合体的时长。

对于大部分miRNA模拟物而言，最大活性在转染后24小时候产生，但是生物检测实验可以在转染后24–72小时内进行。如果转染后的细胞培养超过24小时，我们建议更换新鲜的培液以便获得更好的细胞活力。

使用 mirVana miRNA抑制物分析内源miRNA功能

为了后续应用，请使用一种对于您感兴趣的miRNA表达相对较高的细胞系。

通用转染起始点

mirVana miRNA模拟物和抑制物通常在3–30 nM浓度转染时效果最好。优化实验可以包括1–100 nM的浓度范围。在准备转染复合体时，为提高精确性和可重复性，可以先稀释您的寡聚核苷酸储液，并加入较大体积的稀释后的溶液。

交货时间取决于纯化程度和是否是定制订单。请参考以下大致时间表（中国需要加上国际运输时间）：

标准纯化(5 and 20 nmol) ：4个工作日
HPLC/in vivo ready (250 nmol)：15个工作日
定制mirVana抑制物和模拟物：15个工作日

是的，请将您未发表的miRNA序列提供给我们，我们可以合成一个相应的mirVana模拟物或抑制物，请点击此链接（https://www.thermofisher.com/order/custom-genomic-products/tools/mirna/）订购。

阴性对照的提供需要签署机密信息披露协议（confidential disclosure agreement），而目标序列的提供需要提供购买证明。