固定化无花果蛋白酶（琼脂糖树脂）

Thermo Scientific Pierce 固定化无花果蛋白酶由巯基特异性蛋白酶（无花果蛋白酶）组成，该酶固定在微珠状琼脂糖树脂上，以实现受控的抗体片段化（尤其是小鼠 IgG1）。

Pierce 固定化无花果蛋白酶的特点：

•可从小鼠 IgG1 中生成 Fab 和 F(ab')2 片段
•反应可轻松控制
•抗体片段不含自身消化产物
•消除无花果蛋白酶对抗体片段的污染

无花果蛋白酶与木瓜蛋白酶相似，是一种从无花果乳胶中分离出的非特异性、巯基蛋白酶。无花果蛋白酶的分子量约为 25,000，在 pH 值 4-9.5 下有效，最佳 pH 值为 6.5。在存在半胱氨酸的条件下将 IgG 分子与无花果蛋白酶一起孵育时，铰链区的一个或多个肽键分离，产生 Fab 片段或 F(ab')2 片段。使用木瓜蛋白酶或胃蛋白酶明显难以将小鼠 IgG1 酶切为功能性 Fab 或 F(ab')2 片段，然而，得率和免疫反应性优于使用无花果蛋白酶酶切小鼠 IgG1。固定化无花果蛋白酶专门设计用于将小鼠 IgG1 切割为 Fab 或 F(ab')2 片段，且具有优势，因为它几乎无需自溶、消除了样品中的蛋白酶污染，还可以通过去除无花果蛋白酶或控制样品在固定化无花果蛋白酶柱中的流速来控制酶切。

固定化无花果蛋白酶与游离酶相比能够更加稳定地抵抗热诱导的变性，从而延长活性维持时间。Fab 和 F(ab')2 制备试剂盒包含固定化无花果蛋白酶、其他必要试剂和用于小鼠 IgG1 酶切的优化方案。无花果蛋白酶分别在存在 1 mM 半胱氨酸和 10 mM 半胱氨酸的条件下生成小鼠 IgG1 F(ab')2 和 Fab 片段。通过修饰半胱氨酸浓度和其他酶切参数，也可以从其他物种和同种型中生成片段。