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粘附(转印和结合的)蛋白的稳定性决定了膜在剥离后可成功再次检测的次数。蛋白质可承受剥离的次数最多4次、最少1次。
洗膜缓冲液应与蛋白质免疫印迹中抗体检测步骤之间所用的缓冲液相同。
不能。尽管荧光抗体,如其他抗体,可被Restore缓冲液剥离,但被剥离的膜在后续荧光检测中通常会产生较高的背景。我们建议使用Restore Fluorescent Western Blot剥离缓冲液,货号62299(20 mL)和货号62300(100 mL)。 注意:Restore Fluorescent Western Blot剥离缓冲液仅能用于低荧光PVDF膜(货号22860)。
不能。Restore和Restore Plus缓冲液的剥离力度不足以破坏抗生物素蛋白-生物素相互作用。能够破坏这一相互作用的缓冲液也可能会损害目标蛋白,使其无法被检测到。
不能。抗体可以被去除,但底物会永久沉淀在膜上,不能被去除。Restore和Restore Plus缓冲液专为利用化学发光底物的实验过程而设计。