Dynabeads™ mRNA 纯化试剂盒(用于从总 RNA 制备液中纯化 mRNA)
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Dynabeads™ mRNA 纯化试剂盒(用于从总 RNA 制备液中纯化 mRNA)
Invitrogen™

Dynabeads™ mRNA 纯化试剂盒(用于从总 RNA 制备液中纯化 mRNA)

Dynabeads™ mRNA 纯化试剂盒通常在15分钟内快速分离 mRNA 转录组,提供完整的纯 mRNA。试剂盒设计用于从总 RNA 制备物中特异性靶向、捕获和纯化了解更多信息
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货号数量
610062 mL
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Dynabeads™ mRNA 纯化试剂盒通常在15分钟内快速分离 mRNA 转录组,提供完整的纯 mRNA。试剂盒设计用于从总 RNA 制备物中特异性靶向、捕获和纯化 mRNA 分子。使用 Dynabeads™ mRNA 纯化试剂盒的优势:

•通常在15分钟内获得纯 mRNA
• 高效回收和富集转录组
• 制备适用于几乎每个下游应用的 mRNA

快速纯 mRNA 分离
Dynabeads™ mRNA 纯化试剂盒含有磁珠,用于从任何总真核 RNA 制备液中分离 mRNA 转录组(参见图)。Dynabeads™ 磁珠尺寸均匀,在溶液中高度可移动(参见图)。这使得微珠捕获表面能够在 mRNA 捕获阶段与整个总 RNA 样品快速连续地相互作用。核糖体 RNA 和小 RNA 分子(转运 RNA、microRNA、小核仁 RNA 及小细胞质 RNA)不会与微珠结合,因此丢弃。仅捕获多腺苷酸化 RNA 物质(mRNA),从而获得更清洁、更灵敏的结果(参见图)。在约15分钟内即可分离出纯 mRNA,可随时用于下游应用。

直接可用富集程序
Dynabeads™ mRNA 纯化试剂盒采用稳健的亲和纯化原理,以富集多腺苷酸化 mRNA。首先用结合缓冲液平衡处理与寡核苷酸-(dT)25 偶联的超顺磁性 Dynabeads™,然后与纯化的总 RNA 混合。然后洗涤微珠以去除污染性 RNA 物质,然后用低至 5 µL 的 10 mM Tris-HCl 洗脱 mRNA。使用钕磁铁(单独购买)可促进整个过程,从而在缓冲液更换过程中快速、高效地固定磁珠。RNA 适用于所有下游分子应用,包括:

•基因克隆
• cDNA 合成、cDNA 文库构建
• RT-PCR、定量 RT-PCR
• RPA(核糖核酸酶保护测定)
• 消减杂交
• 斑点/狭线杂交
• 引物延伸
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
洗脱体积5 to 20 μL
最终产品类型mRNA
适用于(应用)逆转录酶 PCR (RT-PCR)
环保功能Beads may be reused for multiple extractions
纯化时间10 min.
数量2 mL
运输条件室温
原始材料量≤100 μL
产量2 μg mRNA per 200 μL of beads (Binding capacity)
分离技术磁珠
样品类型总 RNA
Unit SizeEach
内容与储存
2-8°C
2 mL 微珠 + 缓冲液

常见问题解答 (FAQ)

我在使用Dynabeads磁珠分离mRNA时出现了DNA污染,为什么会出现这种情况?

DNA污染的原因有多种:

•DNA剪切不完全。
•在杂交步骤后,未完全去除样本裂解液。
•清洗不完全和/或洗涤缓冲液去除不完全。
•样本与磁珠的比例过高。

我的Dynabeads磁珠不能很好地吸附到磁力架上,对此你们有什么建议吗?

请查看以下可能原因:

•溶液太粘稠。
•蛋白质间相互作用导致磁珠聚集。

尝试以下建议:
•延长分离时间(将管子留在磁力架上2-5分钟)。
•向裂解液中加入DNase I(约0.01 mg/mL)。
•将结合和/或清洗缓冲液中的Tween20浓度增加至约0.05%。
•向结合和/或清洗缓冲液中加入最多至20 mM 的β-巯基乙醇。

我想要分离较长的双链DNA片段,你们有什么产品可以推荐?

对于小于1 kb的生物素标记DNA,我们推荐使用Dynabeads M270链霉亲和素磁珠和MyOne C1磁珠。对于大于1kb的双链DNA分子,我们推荐Dynabeads KilobaseBINDER试剂盒。KilobaseBINDER试剂包括M-280链霉亲和素偶联的Dynabeads磁珠和一种含有专利的固定活化剂的结合液,可结合较长的生物素化DNA分子以进行分离。请点击以下链接(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/dna-rna-purification-analysis/napamisc/capture-of-biotinylated-targets/immobilisation-of-long-biotinylated-dna-fragments.html),查看关于长的生物素化DNA片段分离的更多信息。

我能否使用Dynabeads磁珠分离单链DNA模板?

可以,Dynabeads磁珠可用于分离单链DNA。链霉亲和素Dynabeads磁珠能够以生物素化的DNA片段为靶标,通过使双链DNA变性,从而去除非生物素化链。链霉亲和素偶联的Dynabeads磁珠不会抑制任何酶活性。因此,可以在固相上直接对磁珠结合的DNA进行下一步处理。请点击以下链接(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/dna-rna-purification-analysis/napamisc/capture-of-biotinylated-targets/preparing-single-stranded-dna-templates.html),查看关于单链DNA捕获的更多信息。

什么是磁化率?

磁化率能够衡量磁珠向磁力架迁移的速度,其大小取决于铁含量和氧化铁的特性。Dynabeads磁珠的磁化率是指质量磁化率,单位可以是cgs单位/g或m^3/kg(国际单位制)。对于亚铁磁性和铁磁性物质,质量磁化率取决于磁场强度(H),这些物质的磁化强度与H不是线性关系,而是随着场强增加而趋于饱和。因此, Dynabeads磁珠的质量磁化率是在固定条件下由标准操作程序而测定的。我们产品目录中给出的质量磁化率是国际单位制。磁化率由从高斯(cgs、emu)单位向国际单位的转换,是通过“高斯系数(emu/g或cgs/g)x 4π x 10^-3”而实现的。所得单位也被称为合理化质量磁化率,与(国际单位制)无量纲磁化率单位有所区别。通常,质量磁化率可用来衡量在非均匀磁场中影响物体的力(Fz)。测定Dynabeads磁珠的质量磁化率时,首先对样本称重,然后将样本放置于已知强度的磁场中。随后,再次称重得到样本重量(F1),并与关闭磁场时样本的重量(F0)进行对比。使用下述公式计算磁化率:K x 10^–3 = [(F1-F0) x m x 0.335 x 10^6],K表示质量为m的样本的质量磁化率。最后,将磁化率转换为国际单位制。