用于体外转录的 Dynabeads 链霉亲和素磁珠提供了一种创新技术,用于简单、灵活、自动化地合成 mRNA,扩展范围从微克到克不等。这个产品尤其适用于对灵活性和质量要求较高的情况,例如在 mRNA 疫苗和疗法开发的发现阶段。
1 μm 单一粒径、单分散的超顺磁珠与链霉亲和素分子共价结合,可与生物素化的 DNA 模板结合。该工作流程旨在大幅度地减少质粒制备的工作量和成本,同时能够在连续的固相体外转录 (IVT) 反应中重复使用模板-磁珠复合物(见下图)。
用于体外转录的 Dynabeads 链霉亲和素磁珠的特点包括:
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灵活——为 IVT 选择 DNA 模板,设计和扩增具有更大的灵活性
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高效——重复使用 DNA 模板和磁珠至少 6 次,以降低成本,并消除或尽量减少质粒制备的手动操作时间,降低细菌宿主 DNA 转移的风险
• 可扩展——在手动和自动化工作流程之间切换,以满足所需的规模(mRNA 产量从微克到克)和通量
• 质量——确保磁珠的安全灵活供应,以便从基于RNA 的药物发现研究到商业化生产,都能使用对应的解决方案(通过OEM 商业供应),不会因转换技术或原材料而耗费额外的时间或成本
工作流程概述
生物素化模板的制作方法是使用生物素化正向引物和非生物素化反向引物,对质粒构建体或合成 DNA 构建体的靶标序列进行 PCR 扩增。作为 PCR 扩增的替代方案,如果质粒设计正确,则可以通过 5' 悬垂序列中的生物素-dUTP 填充反应对线性化质粒进行生物素化。然后,生物素化模板直接固定到用于体外转录的 Dynabeads 链霉亲和素磁珠上,而无需提前纯化。直接在 IVT 中使用与磁珠结合的模板,然后通过磁性分离从合成的 mRNA 中去除(图 1)。该模板可以在连续 IVT 反应中重复使用(至少 6 次)(见下图)。
固相 IVT 可与 MEGAscript T7 转录试剂盒、mMESSAGE mMACHINE T7 转录试剂盒和 mMESSAGE mMACHINE T7 ULTRA 转录试剂盒等常用试剂兼容,可根据您的需求和策略进行加帽和聚腺苷酸化。
此处的磁珠作为单独产品提供。此外,磁珠还包含在
Dynabeads 体外转录和 RNA 纯化试剂盒 中。
可与 KingFisher 自动纯化系统配合使用
1 μm 磁珠适合高通量筛选。该过程可以使用移液工作站或任何
KingFisher 样品纯化系统 自动进行。KingFisher Flex 和 KingFisher Apex 自动纯化工作流程的程序可以从我们的网站获取。
商业化供应
如需了解更多符合 GMP 的 mRNA 疫苗和疗法的对应产品和支持文件,请访问:
thermofisher.cn/dynabeadsmrna.