Poly(A) 尾长测定试剂盒

重新配置的试剂盒提高了效率：76455 1 KT Poly(A) 尾长测定试剂盒 直接取代了 76450 1 Kt，使用常见的实验室设备

• 在 3 个小时内即可测量多个 RNA 的 poly(A) 尾
• 与其他测定方法（如 Northern 印迹）相比，多聚腺苷酸尾长度测量值准确
• 一个试剂盒包含用于 5 G/I 加尾、20 RT 和 80 PCR 反应的优化试剂

描述：
真核 mRNA 的聚腺苷酸化在 RNA 代谢中扮演着关键性角色，其中涉及稳定性、增强翻译、核输出和 miRNA 介导的基因调控。Poly(A) 尾长测定试剂盒 使您仅用三个小时即可快速测量多个 mRNA 的多聚腺苷酸尾。该试剂盒采用创新性 G/I 延伸技术，既保留了 RNA 的 3' 端，又能保证准确测量多聚腺苷酸尾的长度。而且，各种反应成分均经过优化，所以您可以快速获得高质量数据。

描述：
Poly(A) 尾长测定试剂盒通过四个主要步骤即可测定多聚腺苷酸尾的长度（图 1）。

在第 1 步中，多聚腺苷酸聚合酶向含多聚腺苷酸的 RNA 3’'-端添加了有限数量的鸟苷和肌苷。

在第 2 步中，使用新添加的 G/I 尾作为引发位点，通过逆转录将加尾 RNA 转换为 DNA。

在第 3 步中，使用两个引物集生成PCR 扩增产物。生成设计在聚腺苷酸化位点上游（例如 3’-UTR）的基因特异性正向和反向引物，作为靶标基因的对照。第二引物集使用随试剂盒提供的基因特异性正向引物和通用反向引物，生成包含靶标基因多聚腺苷酸尾的产物。

最后，在第 4 步中，PCR 产物在琼脂糖或聚丙烯酰胺凝胶上实现分离（图 2）。

试剂盒组件：
试剂盒包含用于 5 G/I 加尾、20 逆转录和 80 个 PCR 反应的所有必要试剂。

参考文献：
Parker, R. and Song, H. (2004) Nat Struct Mol Biol.11 121-127.
Brodersen, D.E. et al.  (2008) Biochim Biophys Acta.1779, 532-537.
Wu, L., Fan J. and Belasco, J.G.(2006) Proc Natl Acad Sci U S A. 103,4034-4039.
Izaurralde, E. et al.(2009) RNA 15, 21-32.
Martin, G. and Keller, W. (1998) RNA 4, 226-230.
Gauss-Müller, V. et al.(2001) Nucleic Acids Res.29 E57-7