Imject™ 马来酰亚胺活化卵清蛋白
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Thermo Scientific™

Imject™ 马来酰亚胺活化卵清蛋白

Thermo Scientific Imject 马来酰亚胺活化卵清蛋白是巯基反应性卵清蛋白 (OVA),适用于与含有半胱氨酸的肽和其他巯基化抗原发生半抗原-载体偶联。Imject 马来酰亚胺活化卵清蛋白的特点:•马来酰亚胺活化卵清蛋白,在包含稳定剂的 PBS(pH了解更多信息
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Thermo Scientific Imject 马来酰亚胺活化卵清蛋白是巯基反应性卵清蛋白 (OVA),适用于与含有半胱氨酸的肽和其他巯基化抗原发生半抗原-载体偶联。

Imject 马来酰亚胺活化卵清蛋白的特点:

•马来酰亚胺活化卵清蛋白,在包含稳定剂的 PBS(pH 值 7.2)中以冻干形式提供
• 用 5 至 15 摩尔马来酰亚胺/摩尔卵清蛋白进行活化
• 适用于偶联含半胱氨酸的肽抗原,从而形成免疫原或筛选靶标
• 在 2 小时内完成偶联反应;得到稳定的共价硫醚键
• 分子质量为 45,000 道尔顿的单一多肽蛋白
• 含有 14 个天冬氨酸和 33 个谷氨酸残基,其中的羧基导致 OVA 呈净负电荷 (pI 4.63)
• 免疫原性不及钥孔帽贝血蓝蛋白 (KLH),但更易溶于 DMSO(二甲基亚砜),适用于需要此溶剂的应用
• 在将 KLH 作为载体蛋白用于产生抗半抗原的免疫应答后,用作不相关蛋白载体进行抗体筛选和免疫检测

本产品由纯化的载体级卵清蛋白组成,使用 SMCC 交联剂对这一纯化的载体级卵清蛋白进行了改良,以在肽和其他分子的半胱氨酸残基上连接能够与巯基 (-SH) 部分形成共价交联的马来酰亚胺基团。利用所设计的具有末端半胱氨酸残基(作为精确偶联点)的肽抗原,可轻松制备免疫原。每一载体蛋白分子可连接多种抗原分子,而不会通过交联肽序列中的伯胺或羧酸盐而封闭预期抗原决定簇。

载体蛋白是能够在注射后刺激免疫应答的大型复杂分子。成功的生产出特异针对小抗原的抗体(例如:肽段或药物化合物)要求这些半抗原被共价交联于更大、更复杂的分子(通常为某种蛋白质)上,以使其具有免疫原性。基于免疫原性、溶解度以及是否能够与载体达到足够水平的偶联,选择载体蛋白。

卵清蛋白 (OVA) 是鸡蛋清中最丰富的蛋白,它是一种适用于实验室中各种用途的便利蛋白。该 45 kDa 蛋白足够大且足够复杂,使其具有轻度免疫原性。因此,OVA 可用作载体蛋白与半抗原及其他抗原偶联,使后者更具免疫原性,用于免疫接种。即使不常用于制备第一免疫原,OVA 也作为一种普遍使用的载体蛋白用于生成更适合对使用 KLH 或其他更具免疫原性的载体蛋白产生的抗体进行分析(例如涉及涂板的筛选测定)的抗原。

Imject 卵清蛋白的免疫原性不及其他蛋白(钥孔帽贝血蓝蛋白 (KLH))。然而,OVA 的独立结构使其特别适于作为那些本身在典型筛选测定(如 ELISA)中难以操作的肽和其他小抗原的载体。虽然与 BSA 相比更具疏水且在水性缓冲液中的可溶性更低,但卵清蛋白在高达 70% 的 DMSO 中仍具有可溶性,使其适用于与需要 DMSO 进行溶解的半抗原偶联。卵清蛋白含有大量伯胺,其中一些经修饰后形成马来酰亚胺活化卵清蛋白。

相关产品
Imject ™ 卵清蛋白(包含在 PBS 中)
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
数量2 mg
产品线Imject
Unit SizeEach
内容与储存
接收后,在 4°C 下储存产品。产品在环境温度下运输。

常见问题解答 (FAQ)

在设计用于抗体制备的肽段时,我需要考虑什么?

我们建议疏水残基占序列中所有残基的50%或更少。确保每五个氨基酸至少有一个带电残基:这通常被认为可以增强肽段的溶解度。肽段(与折叠和掩盖疏水性氨基酸的多肽相比)太小而不能折叠,因此只有少数疏水性氨基酸可使它们不溶解。

其他指南包括:
•含有多个半胱氨酸、甲硫氨酸和色氨酸的肽段可能难以合成。
•一些序列在固相肽段合成或切割中存在问题,最好避免;这些序列包括天冬氨酸-脯氨酸(Asp-Pro)序列或在合成期间在其侧链上需要庞大保护基团的氨基酸片段。
•甘氨酸通常具有良好的抗原性,因为它只有一个氢侧链;这使其可以完全旋转。

请注意,我们提供定制抗体制备服务(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production.html),包括使用我们专有的抗原分析仪和抗原制备工具(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production/antigen-profiler-antigen-preparation.html)。

抗体制备的最合适的肽段长度是多少?

大多数多肽抗原的长度范围为12至16个残基,并且相对容易合成。9个残基或更短的肽段已经成为抗体制备的有效抗原,但是长于16个氨基酸的多肽可能含有多个表位并形成二级结构。超过18个残基的多肽开始出现更多的合成挑战。在合成您的多肽之前,我们建议您使用多肽序列进行BLASTP搜索。这是为了确保多肽与宿主动物中完全不相关的蛋白质中的序列不同源或相同。

请注意,我们提供定制抗体制备服务(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production.html),包括使用我们专有的抗原分析仪和抗原制备工具(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/antibodies/custom-antibodies/custom-antibody-production/antigen-profiler-antigen-preparation.html)。

抗体对试剂盒包含什么?我可以处理多少样品,以及如何寻找按靶标提供的抗体对试剂盒列表?

抗体对试剂盒包含捕获抗体、检测抗体、重组标准品和HRP偶联物。每个套组都含有足够的试剂来处理四十个96孔板。可查看按靶标提供的抗体对试剂盒列表(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/elisa/antibody-pair-kits.html)。

试剂套组包含什么?我可以处理多少样品,以及如何检查试剂套组是否适用于我的靶标?

试剂套组包含捕获抗体、检测抗体、重组标准品、HRP偶联物、TMB底物和终止液。每个套组都含有足够的试剂来处理五个96孔板。试剂套组包含在ELISA试剂盒(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/elisa/antibody-pair-kits.html)的主列表中(通过“试剂套组”搜索)。

有多少种ELISA试剂盒?我应该如何按靶标查找ELISA试剂盒?

我们提供超过1000种不同的ELISA试剂盒,靶向> 800种不同的分子。您可以查看按靶标查找 ELISA 试剂盒页面(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/protein-biology/protein-assays-analysis/elisa/elisa-kits/target-specific-elisa-kits.html)。