胰蛋白酶酶切试剂盒

准确鉴定和分析蛋白是研究细胞功能和过程的蛋白质组学策略的核心组成部分。使用质谱法可以准确鉴别蛋白和相关翻译后修饰，但该方法高度依赖于样品制备质量。Thermo Scientific Pierce 酶切试剂盒提供的酶和试剂能够进行高效、可重现的酶切和胍基化，改善肽片段电离。

样品制备是蛋白质 MS 分析中较复杂、较耗时的步骤之一，且样品提取和制备的质量和重现性对结果有显著影响。有时，需要采取额外步骤来提高样品质量，包含从 SDS-PAGE 凝胶中酶切和回收肽片段，或进行肽胍基化以改善序列覆盖范围。每种试剂盒均经过优化，以产生高质量的肽酶切物，从而通过质谱进行可靠的蛋白质组学分析。

Pierce 溶液内胰蛋白酶酶切和胍基化试剂盒
Pierce 溶液法胰蛋白酶酶切和胍基化试剂盒提供了优化的程序及可供约 90 份酶切物（每份含 0.025 至 10 µg 蛋白）使用的试剂。

• 全面酶切—胰蛋白酶可全面酶切 0.025-10 µg 范围内的蛋白（∼90 次反应）
• 特异性—胍基化反应几乎不会产生 N 端修饰
• 便利—试剂盒包括用于酶切、还原、烷基化和胍基化的试剂
• 高效—一天内即可完成蛋白的酶切和胍基化

胰蛋白酶可特异性切割精氨酸和赖氨酸残基的羧基侧肽键。由于较高碱性的侧链，含精氨酸的肽的信号通常更强。为了增强整体电离，胍基化将赖氨酸转化为高精氨酸，并且对赖氨酸的胺具有特异性，但肽 N 末端的胺反应可能极轻微。这种衍生化会提高含赖氨酸的肽的强度并改善整体序列覆盖率。

Pierce 胶内胰蛋白酶酶切试剂盒
Pierce 胶内胰蛋白酶酶切试剂盒提供了一整套试剂，用于在胶体考马斯或荧光染料染色蛋白条带上进行约 150 次酶切。该试剂盒包括经修饰的猪胰蛋白酶、脱色缓冲液、还原试剂、烷基化试剂和酶切缓冲液以及详细而简单的说明。

• 全面—包括蛋白凝胶脱色、还原、烷基化和胰蛋白酶酶切的所有必要试剂
• 稳健—经过优化的程序和试剂可使用多种条件生成可靠的酶切物和数据
• 特异性—包含高纯度和经修饰的 MS 级胰蛋白酶，该胰蛋白酶不具有糜蛋白酶活性，具有极低程度的自溶活性

两个关键的样品制备步骤是将蛋白完全酶切成肽段，然后浓缩和纯化肽段进行质谱分析。Pierce 胶内胰蛋白酶酶切试剂盒可完成这些步骤中的第一步，从凝胶切片中提取蛋白质样品。Pierce C-18 离心柱和吸头可完成第二步，纯化 MS 即用型样品。