Bac-to-Bac™ N-His TOPO™ 克隆试剂盒

Bac-to-Bac™ 杆状病毒表达是一种高效的方法，可用于在昆虫细胞中产生高水平蛋白表达的杆状病毒。它基于大肠杆菌中位点特异性转座的重组病毒传代，而非昆虫细胞中的同源重组。新：pFastBacTOPO™ 载体！

可靠和快速蛋白表达
Bac-to-Bac™ 杆状病毒表达系统比传统杆状病毒表达系统更快且更容易，并且保持高水平的蛋白表达。它基于大肠杆菌中的位点特异性的转座，而非昆虫细胞中的同源重组。Bac-to-Bac™ 杆状病毒表达系统在学术文献中受到高度重视。自 2000 年以来每年至少有 80 次引用！

传统杆状病毒系统需要纯化和扩增起始低滴度的病毒上清液。这需要耗时的空斑试验。然而，Bac-to-Bac™ pFastBac™ 载体与 DH10Bac™ 大肠杆菌感受态细胞中的亲本杆粒重组，以形成表达杆粒。将杆粒转染至昆虫细胞，在第一次转染中快速产生高滴度的纯重组杆状病毒颗粒。您将节省数周珍贵时间。在第 10 天采集纯 P2 杆状病毒储备液，无需使用繁琐的噬斑试验（参见图 1）

高表达、易于筛选
pFastBac™ 使用强效多角体蛋白启动子可在各种昆虫细胞系（如 Sf9、Sf21 和 High Five™ 细胞）中产生高水平的表达。

新添加：
Bac-to-Bac™ pFastBac 载体现在也可以 pFastBacTOPO™ 载体的形式提供。pFastBacTOPO™ 载体是 Blunt™ TOPO™ 载体，随附 Mach1™-T1R 大肠杆菌，便于克隆和 pFastBac⁄GOI 增殖。新载体使您能够：

•使用保真度极高的 PCR 酶（如 Accuprime™ Pfx SuperMix）扩增您的目的基因 (GOI)。

•TOPO™ 仅需 5 分钟即可将平末端 PCR 产物克隆到新载体中！

•在氨苄青霉素选择性平板上平板接种后 8 小时可见菌落，因为与其他标准克隆菌株相比，Mach1™-T1R 大肠杆菌细胞具有更快的倍增时间。

•使用 Bac-to-Bac™ N-His TOPO™ 克隆或表达试剂盒，您可以生产一个带有 TEV 切割位点的 N 端 His 融合蛋白，以使用镍螯合树脂（Invitrogen ProBond™ 纯化系统）进行纯化，并使用常用的 Invitrogen AcTEV ™ 蛋白酶辅助生成天然蛋白。

新载体兼具 TOPO™ 克隆技术与高度受到重视的 Bac-to-Bac™ 杆状病毒表达功能，可实现轻松克隆及高水平的蛋白表达。
pFastBacTOPO™ 载体以克隆和表达试剂盒形式提供。