杀稻瘟菌素 S 是从灰色链霉菌中分离出的一种肽基核苷类抗生素。它是细菌和真核细胞中蛋白合成的强效抑制剂,同时对真菌、线虫和肿瘤细胞也具有活性。杀稻瘟菌素 S 通过阻断释放因子诱导的肽基-tRNA 水解而起作用,并抑制肽键形成。可用作哺乳动物细胞和细菌细胞的选择剂了解更多信息
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杀稻瘟菌素 S 是从灰色链霉菌中分离出的一种肽基核苷类抗生素。它是细菌和真核细胞中蛋白合成的强效抑制剂,同时对真菌、线虫和肿瘤细胞也具有活性。杀稻瘟菌素 S 通过阻断释放因子诱导的肽基-tRNA 水解而起作用,并抑制肽键形成。可用作哺乳动物细胞和细菌细胞的选择剂。建议的工作浓度介于 1 至 30 µg/mL 之间,具体取决于细胞系,用于细菌选择的浓度为 25–100 µg/mL。迅速发生细胞死亡,可在不到一周内生成对杀稻瘟菌素稳定耐药的哺乳动物细胞系。
携带 BSR 和 BSD(分别从蜡样芽孢杆菌 K55-S 和土曲霉中分离出)可获得杀稻瘟菌素 S 抗性。BSR 抗性基因编码杀稻瘟菌素 S 脱氨酶,该酶催化杀稻瘟菌素 S 转化为脱氨基羟基杀稻瘟菌素 S。脱氨基羟基稻瘟菌素 S 是杀稻瘟菌素 S 的非生物活性衍生物,不与原核或真核核糖体相互作用,也不抑制原核或真核核糖体。BSD 抗性基因也编码杀稻瘟菌素 S 脱氨酶,该酶催化与 BSR 脱氨酶类似的反应。为了进行细菌选择,LB 培养基的盐含量必须保持低水平(低于 90 mM),pH 值不应超过7.0,以维持杀稻瘟菌素 S 的活性。建议使用杀菌曲线,以确定杀灭非耐药性细胞的杀稻瘟菌素 S 有效浓度下限。
Which of your antibiotics (Geneticin, Zeocin, Hygromycin B, Blasticidin, and Puromycin) can be used together for stable selection in mammalian cells?
All of our antibiotics (Geneticin, Zeocin, Hygromycin B, Blasticidin, and Puromycin) can be used together for making multiple stable cell lines. However, kill curves will need to be performed for each combination of antibiotics since sensitivity to a given antibiotic tends to increase when combined with other antibiotics.
What are the recommended concentrations of antibiotics to use for selection in prokaryotes and eukaryotes?
For best results, optimal concentrations for selection should be determined empirically in each unique experiment through dose response curves. However, to get a general idea of concentrations that have worked for individual cell types, please click on the following url: http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-culture/transfection/selection.html or type in Selection Antibiotics into our main search on www.thermofisher.com.