杀稻瘟菌素 S HCl (10 mg/mL)
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杀稻瘟菌素 S HCl (10 mg/mL)
Gibco™

杀稻瘟菌素 S HCl (10 mg/mL)

杀稻瘟菌素 S 是从灰色链霉菌中分离出的一种肽基核苷类抗生素。它是细菌和真核细胞中蛋白合成的强效抑制剂,同时对真菌、线虫和肿瘤细胞也具有活性。杀稻瘟菌素 S 通过阻断释放因子诱导的肽基-tRNA 水解而起作用,并抑制肽键形成。可用作哺乳动物细胞和细菌细胞的选择剂了解更多信息
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杀稻瘟菌素 S 是从灰色链霉菌中分离出的一种肽基核苷类抗生素。它是细菌和真核细胞中蛋白合成的强效抑制剂,同时对真菌、线虫和肿瘤细胞也具有活性。杀稻瘟菌素 S 通过阻断释放因子诱导的肽基-tRNA 水解而起作用,并抑制肽键形成。可用作哺乳动物细胞和细菌细胞的选择剂。建议的工作浓度介于 1 至 30 µg/mL 之间,具体取决于细胞系,用于细菌选择的浓度为 25–100 µg/mL。迅速发生细胞死亡,可在不到一周内生成对杀稻瘟菌素稳定耐药的哺乳动物细胞系。

携带 BSR 和 BSD(分别从蜡样芽孢杆菌 K55-S 和土曲霉中分离出)可获得杀稻瘟菌素 S 抗性。BSR 抗性基因编码杀稻瘟菌素 S 脱氨酶,该酶催化杀稻瘟菌素 S 转化为脱氨基羟基杀稻瘟菌素 S。脱氨基羟基稻瘟菌素 S 是杀稻瘟菌素 S 的非生物活性衍生物,不与原核或真核核糖体相互作用,也不抑制原核或真核核糖体。BSD 抗性基因也编码杀稻瘟菌素 S 脱氨酶,该酶催化与 BSR 脱氨酶类似的反应。为了进行细菌选择,LB 培养基的盐含量必须保持低水平(低于 90 mM),pH 值不应超过7.0,以维持杀稻瘟菌素 S 的活性。建议使用杀菌曲线,以确定杀灭非耐药性细胞的杀稻瘟菌素 S 有效浓度下限。

应用
查看哺乳动物细胞、大肠杆菌和酵母菌中杀稻瘟菌素选择的详细方案
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
细胞类型真核细胞、原核细胞
最大浓度10 mg/mL
培养类型哺乳动物细胞培养,昆虫细胞培养
产品线Gibco™
数量10 小瓶
有效期9 个月
形式液体
产品类型Geneticin
无菌无菌过滤
加有添加剂HEPES:
Unit SizeEach
内容与储存
储存条件:-5°C 至 -20°C(避光储存)
运输条件:干冰
有效期:自生产之日起 9 个月

常见问题解答 (FAQ)

哺乳动物细胞的稳转筛选过程中可一起使用哪些种类的抗生素(Geneticin,Zeocin,潮霉素B,杀稻瘟素和嘌呤霉素)?

我们所有的抗生素(Geneticin,Zeocin,潮霉素B,杀稻瘟素和嘌呤霉素)均可共用于多重稳转细胞系的建立。不过,需要针对每一种抗生素组合来获取杀菌曲线,因为当与其他抗生素联用时,细胞对某一特定抗生素的灵敏性会出现增加的趋势。

我该如何对我的培养物去污染?

当不可替代的培养物被污染时,研究人员可能会试图控制或消除污染。

1.用户需要确定污染的来源是细菌、真菌、支原体,还是酵母。请点击此处(https://www.thermofisher.com/us/en/home/references/gibco-cell-culture-basics/biological-contamination/bacterial-contamination.h%E2%84%A2l)阅读更多信息,以了解每一种污染的特性。
2.把受污染的培养物跟其他细胞系进行隔离。
3.使用一款实验室消毒剂清洁培养箱和层流柜,并检查HEPA过滤器。
4.高浓度的抗生素和抗真菌剂可能对一些细胞系有毒性。因此,需进行剂量效应测试来确定何种浓度水平的抗生素或抗真菌会造成毒性。这一操作对于使用Gibco Fungizone一类的抗真菌剂或泰乐菌素一类的抗生素尤其重要。

下列操作为我们确定毒性水平和对培养物去污染的推荐步骤:

1.对细胞进行分离,计数, 使用不含抗生素的培养基稀释将细胞稀释至常规传代的浓度。
2.将细胞悬液分入多孔培养板或几个小培养瓶中。向每一培养孔中添加不同浓度的特定抗生素。举例来说,我们推荐以如下浓度测试Gibco Fungizone试剂:0.25,0.50,1.0,2.0,4.0和8.0 µg/mL。
3.每日观察细胞脱落,出现空泡,融汇度降低,细胞变圆一类的毒性效应。
4.一旦确定了抗生素的毒性浓度水平,就可使用比毒性浓度低一至两倍的抗生素浓度来培养细胞两至三代。
5.在不含抗生素的培养基中培养一代。
6.重复步骤4。
7.在不含抗生素的培养基中培养细胞四至六代,以确定污染是否成功被消除。

你们提供哪些抗生素来帮助用户控制或减少细胞培养中的污染情况?

请访问如下页面(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell-culture/antibiotics.html)浏览我们提供的细胞培养相关的抗生素产品。

Which of your antibiotics (Geneticin, Zeocin, Hygromycin B, Blasticidin, and Puromycin) can be used together for stable selection in mammalian cells?

All of our antibiotics (Geneticin, Zeocin, Hygromycin B, Blasticidin, and Puromycin) can be used together for making multiple stable cell lines. However, kill curves will need to be performed for each combination of antibiotics since sensitivity to a given antibiotic tends to increase when combined with other antibiotics.

What are the recommended concentrations of antibiotics to use for selection in prokaryotes and eukaryotes?

For best results, optimal concentrations for selection should be determined empirically in each unique experiment through dose response curves. However, to get a general idea of concentrations that have worked for individual cell types, please click on the following url: http://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-culture/transfection/selection.html or type in “Selection Antibiotics” into our main search on www.thermofisher.com.