PichiaPink™ 培养基试剂盒
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Invitrogen™

PichiaPink™ 培养基试剂盒

PichiaPink™ 培养基试剂盒是一套方便的预包装培养基袋,可与 PichiaPink™ 酵母菌表达系统配合使用。PichiaPink™ 培养基试剂盒包含毕赤酵母菌株从冷冻储备生长至可进行转化和选择的培养物所需的培养基。PichiaPink™ 培养基试剂盒可使用毕赤酵母轻松生产蛋白。使用 PichiaPink™了解更多信息
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货号数量
A111561 Kit
货号 A11156
价格(CNY)
-
数量:
1 Kit
PichiaPink™ 培养基试剂盒是一套方便的预包装培养基袋,可与 PichiaPink™ 酵母菌表达系统配合使用。PichiaPink™ 培养基试剂盒包含毕赤酵母菌株从冷冻储备生长至可进行转化和选择的培养物所需的培养基。PichiaPink™ 培养基试剂盒可使用毕赤酵母轻松生产蛋白。使用 PichiaPink™ 培养基试剂盒再填充 PichiaPink™ 酵母菌表达系统试剂盒。

PichiaPink™ 培养基试剂盒附带以下溶液的预包装袋。每袋制成 1 升溶液。培养基袋应保持干燥,并在室温下储存。

图库用途
YP + 琼脂平板划出菌落2 袋
YP液体培养2 袋
PAD(毕赤酵母腺嘌呤缺陷)+ 琼脂平板生长 PichiaPink™ 重组体2 袋
YP + 山梨醇 (YPS)回收 PichiaPink™ 转化体2 袋
葡萄糖添加至 YP 和 YP + 琼脂1 袋

为什么选择 PichiaPink™ 酵母菌表达系统?
PichiaPink™ 酵母菌表达系统以酵母菌毕赤酵母为基础。毕赤酵母的优点包括快速生长、明确的遗传背景、简单的培养基配方和易于处理。30 多年来,毕赤酵母已经被全球实验室用于生产来自多个物种(包括人类)的数百种不同蛋白(参考文献 1、2)。PichiaPink™ 酵母菌表达系统使您能够以便利且具成本效益的方式实现从小规模到大规模的蛋白质生产。

有关获取 PichiaPink™ 酵母菌表达系统商业用途许可证的信息,请访问outlicensing@lifetech.com

仅供研究使用。不适用于任何动物或人的治疗或诊断。

相关链接
请参阅了解更多有关 PichiaPink™ 酵母表达系统的信息
了解更多有关其他蛋白表达系统的信息

参考文献

1.Cereghino JL, Cregg JM.Heterologous protein expression in the methylotrophic yeast Pichia pastoris.FEMS Microbiol Rev. 2000 Jan;24(1):45-66.[PubMed]
2.Cereghino GP, Cereghino JL, Ilgen C, Cregg JM.Production of recombinant proteins in fermenter cultures of the yeast Pichia pastoris.Curr Opin Biotechnol.2002 Aug;13(4):329-32.[PubMed]
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
最终产品类型液体培养基、琼脂平板
适用于(设备)A11150, A11151, A11152, A11153
产品规格试剂盒
培养基类型PAD, YP, YPS
制备方法高压灭菌
数量1 Kit
运输条件室温
应变指示PichiaPink™
形式粉末
靶标有机物类毕赤酵母
Unit SizeEach
内容与储存

含有足以制成 4 种基本培养基的袋:

2 袋 PAD 琼脂、2 袋 YPDS、2 袋 YPD、2 袋 YPD 琼脂、1 袋葡萄糖


室温保存

常见问题解答 (FAQ)

我将一个菌落接种到25 mL MGY中,过夜生长,但OD值并不在使用手册中所述的2-6之间。哪里出错了?

这可能是因为接种物较少。我们建议使用起始培养物,这比使用菌落更精确。您可使用倍增时间来计算起始OD。在YPD中,倍增时间约为1.5小时。在MGY中,倍增时间约为3小时。

当使用pPIC6/pPIC6α载体在X-33酵母株中筛选杀稻瘟菌素抗性转化株时,为什么在含300 μg/ml杀稻瘟菌素的YPD培养皿中得到的菌落有大有小?

通常,大菌落代表含pPIC6/pPIC6α整合体的转化株,而小菌落代表含pPIC6/pPIC6α非整合体的转化株。这些非整合体转化株已经转导了pPIC6/pPIC6α质粒,因此,在起始筛选过程中表现出低水平的杀稻瘟菌素抗性。在后续筛选中,这些非整合体转化株不会保持杀稻瘟菌素抗性。

当您为表达实验选择杀稻瘟菌素抗性转化株时,我们建议您从起始转化培养皿中挑选杀稻瘟菌素抗性菌落,然后在第二个含有适当浓度杀稻瘟菌素的YPD培养皿中划线。应选择可保持杀稻瘟菌素抗性的转化株用于下一步研究。

我的转化失败了。你们有何建议?

•应确保收集的是处于对数生长期的细胞(通常OD <1.0)。
•如果使用电穿孔法,应查看电穿孔仪使用手册中的推荐条件。可根据需要,改变电穿孔参数。
•使用更多的DNA。
•使用新鲜配制的感受态细胞。
•如果使用LiCl转化法,可尝试煮沸载体DNA。

我成功制备了两次Pichia的原生质球,之后就制备不成功了。培养物的OD值根本不降低。

应考虑以下几点:

1.如果所用细胞的OD值过高,则它们不能形成原生质球。不要使细胞过度生长。
2.不要使用衰老的细胞,应确保细胞处于对数生长期。
3.使用前,将酵母裂解酶混合均匀。酵母裂解酶更大程度上是一种悬液,而非溶液。
4.每次都使用新鲜配制的PEG溶液,并检查pH。

使用蛋白胨或胰蛋白胨在Pichia培养基中有功能上的差异吗?

细菌用-胰蛋白胨和细菌用-蛋白胨是两种不同的特定类型蛋白胨。细菌用胰蛋白胨是一种稍差的氮源,更多的氮是由酪氨酸和色氨酸提供的。将它们作为Pichia生长培养基的组分进行比较时,生长曲线会稍有不同,但差异很小。在以酵母氮源基础作为主要氮源的Pichia培养基配方中,如BMGY和BMMY,差异非常小或无差异。