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Gibco™
Bac-to-Bac™ HBM TOPO™ 克隆试剂盒
Bac-to-Bac™ HBM TOPO™ 克隆试剂盒
| 货号 | 反应次数 |
|---|---|
| A11338 | 20 次反应 |
货号 A11338
价格（CNY)
37,426.00
Each
反应次数:
20 次反应
价格（CNY)
37,426.00
Each
Bac-to-Bac™ Baculovirus Expression is an efficient method for producing baculovirus for high-level protein expression in insect cells. It relies on generation of recombinant virus by site-specific transposition in E. coli (DH10Bac™) rather than homologous recombination in insect cells. The new pFastBac™ HBM TOPO™ vector enables secreted protein expression because it has the honeybee melittin (HBM) secretion signal. The new vector should be strongly considered for the expression of glycoproteins. Glycoproteins cannot be glycosylated in the absence of any secretion signal. In contrast to glycoproteins secreted from mammalian cells, glycoproteins secreted from baculovirus can be easily de-glycosylated in vitro. This is a very important feature in order to crystallize proteins!
Bac-to-Bac™ 杆状病毒表达是一种生产杆状病毒的有效方法，可用于昆虫细胞中高水平蛋白表达。依赖于通过大肠杆菌 (DH10Bac™) 位点特异性转位而不是昆虫细胞中的同源重组进行的重组病毒生成。新型 pFastBac™ HBM TOPO™ 载体可实现分泌性蛋白表达，因为其具有蜜蜂蜂毒素 (HBM) 分泌信号。对于糖蛋白的表达，应强烈考虑新载体。在无任何分泌信号的情况下，糖蛋白不能糖基化。与哺乳动物细胞分泌的糖蛋白相比，杆状病毒分泌的糖蛋白在体外容易去糖基化。这是使蛋白质结晶的一个非常重要的特点！
pFastBac™ HBM TOPO™ 载体还具有一个带有 TEV 切割信号的 C 端 His 标签，能够用于使用镍螯合树脂（ProBond™ 纯化系统）轻松纯化组氨酸融合蛋白，并借助于 AcTev™ 蛋白酶生成天然蛋白。
该载体使用强效多角体蛋白启动子在多种昆虫细胞系（如 Gibco Sf-900 II & Sf-900™ III 培养基中的 Sf9、Mimic™ Sf9、Sf21 和 High Five™ 细胞）中产生高水平的表达。
传统杆状病毒系统需要纯化和扩增初始低滴度病毒上清液。这需要耗时的噬斑试验。然而，Bac-to-Bac™ pFastBac™ 载体与 DH10Bac™ 大肠杆菌感受态细胞中的亲本杆粒重组，以形成表达杆粒。将杆粒转染至昆虫细胞，在第一次转染中快速产生高滴度的纯重组杆状病毒颗粒。您将节省数周珍贵时间。第 10 天收集纯 P2 杆状病毒储备液，无需进行繁琐的噬斑试验。
pFastBac™ HBM TOPO™ 载体还具有一个带有 TEV 切割信号的 C 端 His 标签，能够用于使用镍螯合树脂（ProBond™ 纯化系统）轻松纯化组氨酸融合蛋白，并借助于 AcTev™ 蛋白酶生成天然蛋白。
该载体使用强效多角体蛋白启动子在多种昆虫细胞系（如 Gibco Sf-900 II & Sf-900™ III 培养基中的 Sf9、Mimic™ Sf9、Sf21 和 High Five™ 细胞）中产生高水平的表达。
传统杆状病毒系统需要纯化和扩增初始低滴度病毒上清液。这需要耗时的噬斑试验。然而，Bac-to-Bac™ pFastBac™ 载体与 DH10Bac™ 大肠杆菌感受态细胞中的亲本杆粒重组，以形成表达杆粒。将杆粒转染至昆虫细胞，在第一次转染中快速产生高滴度的纯重组杆状病毒颗粒。您将节省数周珍贵时间。第 10 天收集纯 P2 杆状病毒储备液，无需进行繁琐的噬斑试验。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
细胞系High Five™,Sf21,Sf9
细胞类型昆虫细胞
切割TEV 蛋白酶识别位点
克隆方法Blunt TOPO
表达机制基于细胞的表达
表达系统杆状病毒
适用于（应用）蛋白表达
高通量能力高通量兼容性、非高通量兼容性（手动）
关键功能分泌型表达
反应次数20 次反应
产品线Bac-to-Bac、TOPO
产品类型克隆试剂盒
促进剂多角体蛋白
蛋白标记HBM（蜜蜂蜂毒素），His 标签 (6x)
选择试剂（真核生物）无
载体pFastBac/HBM-TOPO
产品规格试剂盒
Unit SizeEach
内容与储存
Bac-to-Bac™ HBM TOPO™ 克隆试剂盒含有：（有关详细信息，请参阅手册）
•用于 20 次 topo 克隆反应的载体试剂盒
• 含有 C 端 TEV 切割位点和 His 标签的 pFastBac⁄HBM TOPO™ 载体。
• pFastBac⁄CT-Gus 对照质粒（对照表达载体）
•提供的其他试剂：10x PCR、dNTP 混合物、盐溶液、无菌水、对照 PCR 模板、多角体蛋白正向引物、SV40 pA 反向引物
•含有感受态细胞的试剂盒（20 次反应）：
•One Shot™ Mach1-T1R 化学感受态大肠杆菌
载体试剂盒：储存在 -20°C 下
One Shot™ Mach1-T1R 化学感受态大肠杆菌：储存在 -80°C 下
•用于 20 次 topo 克隆反应的载体试剂盒
• 含有 C 端 TEV 切割位点和 His 标签的 pFastBac⁄HBM TOPO™ 载体。
• pFastBac⁄CT-Gus 对照质粒（对照表达载体）
•提供的其他试剂：10x PCR、dNTP 混合物、盐溶液、无菌水、对照 PCR 模板、多角体蛋白正向引物、SV40 pA 反向引物
•含有感受态细胞的试剂盒（20 次反应）：
•One Shot™ Mach1-T1R 化学感受态大肠杆菌
载体试剂盒：储存在 -20°C 下
One Shot™ Mach1-T1R 化学感受态大肠杆菌：储存在 -80°C 下