Bac-to-Bac™ HBM TOPO™ 克隆试剂盒

Bac-to-Bac™ 杆状病毒表达是一种生产杆状病毒的有效方法，可用于昆虫细胞中高水平蛋白表达。依赖于通过大肠杆菌 (DH10Bac™) 位点特异性转位而不是昆虫细胞中的同源重组进行的重组病毒生成。新型 pFastBac™ HBM TOPO™ 载体可实现分泌性蛋白表达，因为其具有蜜蜂蜂毒素 (HBM) 分泌信号。对于糖蛋白的表达，应强烈考虑新载体。在无任何分泌信号的情况下，糖蛋白不能糖基化。与哺乳动物细胞分泌的糖蛋白相比，杆状病毒分泌的糖蛋白在体外容易去糖基化。这是使蛋白质结晶的一个非常重要的特点！

pFastBac™ HBM TOPO™ 载体还具有一个带有 TEV 切割信号的 C 端 His 标签，能够用于使用镍螯合树脂（ProBond™ 纯化系统）轻松纯化组氨酸融合蛋白，并借助于 AcTev™ 蛋白酶生成天然蛋白。
该载体使用强效多角体蛋白启动子在多种昆虫细胞系（如 Gibco Sf-900 II & Sf-900™ III 培养基中的 Sf9、Mimic™ Sf9、Sf21 和 High Five™ 细胞）中产生高水平的表达。

传统杆状病毒系统需要纯化和扩增初始低滴度病毒上清液。这需要耗时的噬斑试验。然而，Bac-to-Bac™ pFastBac™ 载体与 DH10Bac™ 大肠杆菌感受态细胞中的亲本杆粒重组，以形成表达杆粒。将杆粒转染至昆虫细胞，在第一次转染中快速产生高滴度的纯重组杆状病毒颗粒。您将节省数周珍贵时间。第 10 天收集纯 P2 杆状病毒储备液，无需进行繁琐的噬斑试验。