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pSyn_1的启动子是Psc。Psc是一种弱组成型启动子,可启动目的基因的基础表达。而pSyn_6的启动子是psbA启动子(PpsbA)。PpsbA是细长聚球藻psbA基因(编码光合系统II蛋白D1)的一种强组成型启动子,可启动目的基因的高水平表达。
pSyn_1的启动子是Psc。Psc是一种弱组成型启动子,可启动目的基因的本底表达。该启动子来自集胞藻PCC6803的茄呢酰二磷酸酯合酶基因。注意:该弱组成型启动子适用于受强表达阻碍的应用,如通路基因工程或低水平表达型突变基因的互补作用(Simkovsky et al., 2012)。 pSyn_6的启动子是psbA启动子(PpsbA)。PpsbA是细长聚球藻psbA基因(编码光合系统II蛋白D1)的一种强组成型启动子,可启动目的基因的高水平表达。pSyn-6载体还包括一个用于有效起始翻译的核糖体结合位点(GAAGGAG)和一个终止密码子。载体骨架还包含一个6xHis TEV和一个V5-His附加表位,用于检测/纯化目的基因。两种载体都含有NS1(中性位点1)同源重组位点,用于将载体整合到细长聚球藻基因组中。
聚球藻在保存6个月后不会丧失活力。我们尚未对超过6个月的保存时间进行测试。
在基因组中性位点1(Neutral Site 1)之间和质粒的NSa和NSb之间发生双重同源重组事件,从而将目的基因和壮观美素抗性整合到中性位点1内的基因组中。
使用的是Synechococcus elongatus PCC 7942,一种模型蓝藻。