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Expi293表达培养基并不直接兼容ProBond或Ni-NTA纯化系统。我们推荐在用His标签的纯化操作之前进行一次缓冲体系交换或样本透析。
大多数293细胞系均能适应从传统含血清或其它无血清培养基向Expi293表达培养基中的切换按照手册中所描述的直接切换法或序贯切换法来操作,大多数293细胞系均能适应从传统含血清或其它无血清培养基向Expi293表达培养基中的切换。 注意:切换后的细胞可能无法达到与Expi293F细胞同等的高水平表达。
我们推荐使用pcDNA 3.4-TOPO TA载体(货号A14697)。这一载体含有天然的全长CMV启动子和克隆位点下游的WPRE(旱獭转录后调控元件),这两个元件均有利于基因的高水平表达(表达比pcDNA3.3 TOPO载体高大约2-3倍,而后者又比标准的pcDNA载体高2-5倍)。当然,实际表达水平还要视具体蛋白而定。
除了Opti-MEM I低血清培养基为无血清但不是非动物源性的外,本系统中的其余成份均为非动物源性的,请参考应用说明(https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/migration/files/proteins-expression-isolation-analysis/pdfs.par.5943.file.dat/expi-293-animal-origin-free-co25751.pdf): 在非动物源性的条件下使用Expi293表达系统。
我们为蛋白的稳定高产量生产提供Freedom CHO-S与Freedom DG44试剂盒。我们为瞬时高产量生产提供ExpiCHO表达系统,Expi293表达系统,FreeStyle 293 表达系统,FreeStyle Max 293表达系统和FreeStyle Max CHO表达系统。如需在Exp293F细胞中高效表达功能性膜蛋白,我们还提供了Expi293 MembranePro 表达系统(货号A25869,A25870),这款产品将Expi293的扩展性/易用性与MembranePro技术整合起来,能够将膜蛋白的表达产量大大提升,超出标准贴壁培养的MembranePro功能性蛋白表达系统的表达产量20倍以上。请参见 应用说明(https://www.thermofisher.com/content/dam/LifeTech/global/life-sciences/ProteinExpressionAnalysis/pdfs/PG1391-PJ6257-CO28704-Expi293Adaption-MembraneProTech_AppNoteGlobal-FHR.pdf) 以了解更多详情。