Alexa Fluor™ 488 TFP 酯

Alexa Fluor™ 染料是可用于向蛋白、胺修饰的寡核苷酸和其他含胺分子的伯胺 (R-NH2) 添加荧光标记的活性分子。所得 Alexa Fluor™ 偶联物显示出比其他光谱相似荧光基团的偶联物更亮的荧光和更高的光稳定性。Alexa Fluor™ 488 TFP 酯生成激发/发射波长为 495/515 nm 的偶联物，其与荧光素 (FITC) 和 Cy2 偶联物光谱相似。

Alexa Fluor™ 染料可提供跨越可见光和近红外光谱的荧光发射（参见 Molecular Probes™ 手册中 Alexa Fluor™ 染料系列 — 注释1.1），并提供在不同生物环境中兼容的水溶性和 pH 值不敏感（pH 值为 4-10 的范围内）的独特组合。

TFP（四氟苯基）酯是琥珀酰亚胺酯（SE 或 NHS 酯）化学试剂的改进，通常用于将荧光基团或半抗原连接到生物分子的伯胺上。两种反应性化学基团均可在染料或半抗原与目标化合物之间产生相同的强烈酰胺键，但在偶联反应过程中，TFP 酯不易自发水解。Alexa Fluor™ TFP 酯在通常用于反应的碱性 pH 值下可稳定数小时，远超过琥珀酰亚胺酯。

典型偶联反应
您可以将胺反应性试剂与几乎任何蛋白或肽偶联；提供的方案针对 IgG 抗体进行了优化。您可以针对任何量的蛋白按比例缩放反应，但为了获得最佳结果，蛋白的浓度应至少为 2 mg/mL。我们建议使用反应性试剂与蛋白的三种不同摩尔比进行三种不同程度的标记。

Alexa Fluor™ TFP 酯通常溶于高质量的无水二甲亚砜 (DMSO) (D12345) 中，并在 0.1 – 0.2 M 碳酸氢钠缓冲液（pH 值为8.3）中于室温下持续反应1小时。由于末端胺的 pKa 低于赖氨酸 ε-氨基基团的 pKa，您可以使用接近中性 pH 值的缓冲液对胺末端进行更具选择性的标记。

偶联物纯化
通常使用凝胶过滤柱（如 Sephadex™ G-25、BioGel™ P-30 或等效柱）将标记抗体与游离 Alexa Fluor™ 染料分离。对于更大或更小的蛋白，选择具有适当分子量滤除点的凝胶过滤介质或通过透析纯化。

了解更多关于蛋白和抗体标记的信息
我们提供多种可供选择的 Molecular Probes™ 抗体和蛋白标记试剂盒，以适应您的起始材料和实验设置。参见 A 至 Z 的抗体标记或使用我们的标记化学选择工具进行其他选择。欲了解有关我们标记试剂盒的更多信息，请参阅 Molecular Probes™ 手册中的蛋白和核酸标记试剂盒 — 1.2节。

我们还可为您定制偶联物
如果您无法在我们的在线目录中找到想要的产品，我们还可为您定制抗体或蛋白偶联物。我们的定制结合服务是高效且保密的，我们通过了 ISO 9001:2000 认证。