Ambion™ DNase I(无 RNase)
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Ambion™ DNase I(无 RNase)
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Ambion™ DNase I(无 RNase)

Ambion DNase I(无 RNase)(E.C.3.1.21.1) 是一种非特异性核酸内切酶,能够降解双链和单链 DNA 及染色质。它通过水解磷酸二酯键产生具有了解更多信息
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Ambion DNase I(无 RNase)(E.C.3.1.21.1) 是一种非特异性核酸内切酶,能够降解双链和单链 DNA 及染色质。它通过水解磷酸二酯键产生具有 5'-磷酸基和 3'-羟基的单核苷酸和寡核苷酸发挥作用。无 RNase 的 DNase I 是现有酶中纯度较高的种类,建议在不含 RNase 的情况下降解 DNA,无 RNase 对于保持 RNA 的完整性至关重要。例如,DNase I 常用于体外转录后去除模板 DNA,以及去除总 RNA 制备物中的 DNA 污染(特别是源自那些可能含有质粒 DNA 的转染细胞的 DNA 污染),可用于核糖核酸酶保护试验、cDNA 文库收缩以及 RT-PCR。为了达到最大活性,DNase I 需要二价阳离子(Mg2+ 和 Ca2+,分别约为 5 mM 和 0.5 mM),且最佳 pH 值为 7.8。

DNase I(不含 RNase)优于竞争对手
援引自 BioTechniques 的一篇研究报告 (Matthews et al., 32: 1412-1417, 2002) 比较了来自 Sigma、Roche、Applied Science、Qiagen 和 Ambion 的 DNase I 剂中的 RNase 污染。结果表明:“除了 Ambion™ 的无 RNase DNase I 外,体外转录反应的 cRNA 完整性均受损,且仍受到了 DNA 污染。Ambion™ 的 DNase 用于其余需要 DNase 酶切的实验…”。已对 Ambion™ DNase I 进行了 RNase 污染和蛋白酶活性的测试。对人基因组 DNA 进行酶切,然后对未酶切的 DNA 进行定量实时 PCR 检测,以确定功能性。

单位定义
一单位是指在 10 min 内于 37°C 下完全降解 1 µg DNA 所需的酶量,相当于 0.04 Kunitz 单位。

辅助产品
如需要牛 DNase I 的替代品,请考虑重组 DNase I(货号 AM2235)。对于活性更高、耐盐的 DNase,请参阅 TURBO™ DNase 产品(货号 AM2239 和 AM2238)。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
产品类型DNase I
数量5 x 2000 U
运输条件干冰
最大浓度2 U/μL
DNase
产品线Ambion™
Unit SizeEach
内容与储存
-20°C

常见问题解答 (FAQ)

DNase I需要哪些辅助因子?DNase I会消化ssDNA吗?

镁和钙是DNase I所需的辅助因子。DNase I确能消化ssDNA。

What cofactors are required for DNase I? Does DNase I digest ssDNA?

Magnesium and calcium are required cofactors for DNase I. DNase I does digest ssDNA.

How can I inactivate DNase I?

Add of 1 µL of 25 mM EDTA solution to the reaction mixture in 10 µL reaction with 1 unit DNase I, Amplification Grade (or 1:1 molar ratio of Mg++ ions:EDTA) to chelate the Mg++ ions in the DNase I buffer. Heat for 10 min at 65 degrees C.

Note: It is vital that the EDTA be at least at 2 mM prior to heat-inactivation to avoid Mg-dependent RNA hydrolysis.

DNA-free and Turbo-free versions of DNase I can be inactivated with included DNase Inactivation Reagent.

Are your DNase I products RNase-free?

Most of our DNase I products are guaranteed free of RNase activity. However, please note that Cat. No. 18047-019 is not tested for RNAse and is recommended primarily for protein applications. The other products are suitable for removing DNA from both RNA and protein preparations, for nick translating DNA, and for generating random fragments of DNA. For more demanding RT-PCR applications, we recommend using DNAse I, Amplification Grade.

Can I use Ambion DNase I for on-column DNA digestion?

We do not recommend using Ambion DNase I for on-column DNA digestion since this application requires higher concentration of the enzyme.