使用哪种盐可以沉淀总RNA?每种盐的优势是什么?这些盐是否需要使用乙醇?
可使用以下3种盐:
•硫氰酸胍,需要乙醇。硫氰酸胍是分离RNA的常用试剂,我们特别推荐将其用于核糖核酸酶活性较高的组织,如胰腺或脾脏。
•醋酸铵,需要乙醇。醋酸铵可用于减少不必要的dNTPs和寡糖共沉淀。但是,纯化的核酸如果后续要使用T4多核苷酸激酶处理的话,不能使用醋酸铵,因为铵离子会抑制T4多核苷酸激酶。
•氯化锂,不需要乙醇。LiCl能有效沉淀RNA而不能有效沉淀蛋白质或DNA,而且也不会沉淀未掺入的游离核苷酸。
•硫氰酸胍,需要乙醇。硫氰酸胍是分离RNA的常用试剂,我们特别推荐将其用于核糖核酸酶活性较高的组织,如胰腺或脾脏。
•醋酸铵,需要乙醇。醋酸铵可用于减少不必要的dNTPs和寡糖共沉淀。但是,纯化的核酸如果后续要使用T4多核苷酸激酶处理的话,不能使用醋酸铵,因为铵离子会抑制T4多核苷酸激酶。
•氯化锂,不需要乙醇。LiCl能有效沉淀RNA而不能有效沉淀蛋白质或DNA,而且也不会沉淀未掺入的游离核苷酸。