Alexa Fluor™647 酪胺 SuperBoost™ 试剂盒(山羊抗小鼠 IgG)
Invitrogen17万+抗体限时买二赠一,靶点广,灵活用!
Alexa Fluor™647 酪胺 SuperBoost™ 试剂盒(山羊抗小鼠 IgG)
Invitrogen™

Alexa Fluor™647 酪胺 SuperBoost™ 试剂盒(山羊抗小鼠 IgG)

SuperBoost™ 酪胺信号放大是检测多重荧光免疫细胞化学 (ICC)、免疫组织化学 (IHC ) 和原位杂交 (ISH) 应用中的低丰度靶标的最灵敏方法。SuperBoost了解更多信息
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B40916150 slides
货号 B40916
价格(CNY)
6,025.00
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Ends: 31-Dec-2025
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SuperBoost™ 酪胺信号放大是检测多重荧光免疫细胞化学 (ICC)、免疫组织化学 (IHC ) 和原位杂交 (ISH) 应用中的低丰度靶标的最灵敏方法。SuperBoost 试剂盒集 AlexaFluor™ 染料的亮度与 poly-HRP 介导的酪胺标记反应的出色信号放大功能于一身,灵敏度相当于标准方法10-200倍。SuperBoost 试剂盒的灵敏度也比 TSA™ 等常规酪胺放大技术高出2-10倍。为实现优异的研究结果,SuperBoost 试剂盒可提供成像方法难以提供的更为清晰的关键区域。

SuperBoost 试剂盒使用简便,可根据标准 ICC、IHC 或 FISH 实验方案轻松灵活调整,适用于任意类型的细胞或组织。使用 SuperBoost 试剂盒标记的细胞适用于任意类型的显微镜,可生成高分辨率的多重分析图像。这款特殊的试剂盒采用 AlexaFluor 647酪胺(650/688激发/发射波长),可通过标准 Deep Red/Cy5滤光片立方体检测。该试剂盒还含有多聚 HRP 标记的山羊抗小鼠 IgG 二抗。

SuperBoost 试剂盒的功能包括:
•通过荧光成像技术超高灵敏度检测低含量或复杂靶标
• 采用标准滤光片的简单实验方案和检测过程
• 适用于与—DAPI、二抗或其他 SuperBoost试剂盒共标记的高分辨率的多重分析图像
• 相对于标准 ICC/IHC/ISH 实验,所需的一抗量减少了10-100倍

SuperBoost 试剂盒基于酪胺信号放大系统,利用辣根过氧化物酶 (HRP) 的催化活性在原位高密度标记靶标蛋白或核酸序列。使用 SuperBoost 试剂盒进行的普通 ICC/IHC/ISH 实验所需一抗量比标准 ICC/IHC/ISH 实验少了10-100倍。SuperBoost 试剂盒可提供远高于背景的特异性信号强度,因此可以轻松优化实验方案,以便从观测到较高的内源性自发荧光的样品中检测特异性信号

SuperBoost 试剂盒的优点

利用 Alexa Fluor 酪胺增强信号:SuperBoost 试剂盒利用可与 HRP 反应的 Alexa Fluor 酰胺,最终将明亮、光稳定的 Alexa Fluor 染料沉积在周围蛋白质和其他类似分子上。SuperBoost 试剂盒是唯一款能够集 Alexa Fluor 染料的亮度与酪胺信号放大的增强功能于一身,以生成优异的信号的试剂盒。

聚HRP 优点:与 TSA 不同,SuperBoost 试剂盒采用了 聚HRP 偶联的二抗。在此系统中,多种 HRP 酶与短链聚合物偶联,比常规 HRP 系统将信号增强数倍。聚HRP 的结构形式使抗体能够像常规 HRP 偶联二抗一样,有效透过细胞或组织。酶/抗体蛋白的摩尔比的平均值为“4”。

反应终止液:与任何基于酶的标记系统一样,此系统也会发生信号过溢的情况。SuperBoost 试剂盒包含 HRP 终止液,可终止 HRP 反应。可利用 HRP 终止液获取尽可能高的信号,同时又不会导致背景信号升高。优化的 HRP 反应所获得的图像与标准 ICC/IHC/ISH 方法产生的图像一样清晰,但灵敏度提高了10-200倍。

背景更低:SuperBoost 试剂盒包含用于消除或减少内源性过氧化物酶和荧光背景信号的阻断剂。这些阻断剂有助于确保仅增强特异性信号,同时阻断非特异性/背景信号。

仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
产品类型酪胺试剂盒
数量150 slides
有效期每 6 个月
运输条件经批准可在室温下或置于湿冰上运输
偶联物Alexa Fluor 647
产品线SuperBoost™
Unit SizeEach
内容与储存
1个试剂盒足以用于150个显微镜玻片 (18 x 18 mm),其中含有:封闭缓冲液 (1X),22.5 mL
  • 聚-HRP-偶联山羊抗小鼠二抗 (1X),22.5 mL
  • Alexa Fluor 酪胺试剂
  • 过氧化氢
  • 常见问题解答 (FAQ)

    我用了一种神经元特异性抗体标记自己的神经元,但我无法从偶联荧光染料的一抗中获得足够的信号。我该如何改善?

    以下是我们的建议:

    •使用我们偶联了明亮的、光稳定性Alexa Fluor 染料的二抗。每个荧光二抗IgG分子上标记有2-8个荧光基团,每个一抗含有三个潜在的二抗结合位点,能够提供大约10-20荧光团/抗体的信号放大等级。
    •此外,也可采用生物素结合的二抗以及荧光素-链霉亲和素偶联物检测一抗,或者采用链霉亲和素桥连Qdot 生物素等生物素结合的报告载体来检测一抗。尽管额外的孵育和内源性生物素封闭步骤会增加处理时间,但链霉亲和素标记也会提高检测灵敏度。
    •对于低丰度的靶标,为得到最佳信噪比,可能要对信号进行放大。酪胺信号放大技术(TSA)是一种酶介导的检测方法,其利用辣根过氧化物酶(HRP)的催化活性产生具备反应活性的荧光团标记酪胺自由基。这些短寿命的酪胺自由基共价结合到相互作用位点临近的残基上,在HRP-靶相互作用位点上产生放大的荧光信号。
    •如需提升快速漂白染料的检测灵敏度,我们的SlowFade Diamond或ProLong Diamond 抗猝灭试剂已经证实可增加光稳定性,降低固定细胞、组织和无细胞制备物中的初始荧光淬灭。
    •请访问此网页(https://www.thermofisher.com/us/en/home/references/newsletters-and-journals/bioprobes-journal-of-cell-biology-applications/bioprobes-issues-2011/bioprobes-66-october-2011/guide-to-immunocytochemistry.html)了解进一步的优化的要点。

    我的抗原丰度极低,如何放大信号?

    放大抗体检测效果的常用方法是生物素-链霉亲和素检测,使生物素化的二抗结合偶联染料的链霉亲和素。该方法能够将信号放大约2-8倍,但在此之前必须先封闭内源性生物素。另一种方法是使用酪胺信号放大技术,将辣根过氧化物酶偶联物与染料标记的酪胺配合使用。该方法能够将信号放大约10-20倍,但在此之前必须先封闭内源性过氧化物酶。最后一种方法是使用Qdot纳米晶体抗体或链霉亲和素偶联物,根据Qdot颜色,该方法可产生高于标准有机染料偶联物40倍的信号。

    When using the Alexa Fluor 647 Tyramide SuperBoost Kit, goat anti-mouse IgG (Cat. No. B40916), do I have to remove the 100 µL of tyramide working solution before adding 100 µL of reaction stop reagent (see step 3.2 and 3.3 in User Guide)?

    It is not necessary to remove the 100 µL of tyramide working solution (step 3.2 in User Guide) before adding the 100 µL of reaction stop reagent (step 3.3 in User Guide; see link here: https://assets.thermofisher.com/TFS-Assets%2FLSG%2Fmanuals%2FMAN0015834_Tyramide_SuperBoost_Kits_UG.pdf). You can just add it directly to the cell or tissue sample.

    Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Imaging Support Center.

    With a SuperBoost tyramide kit, I got excessive and non-specific labeling. What can I do to limit background and acquire a more localized labeling?

    To limit background, we recommend performing a pre-blocking step with 3% H2O2 for 60 mins to inactivate endogenous peroxidases. To limit the localization of labeling, we recommend optimizing the final concentration of the primary and secondary antibodies and the dye-tyramide. You may also limit the incubation time of the dye-tyramide on the sample.

    Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

    Is it possible to perform dual TSA labeling with SuperBoost tyramide kits?

    Yes. This involves the sequential application of the antibodies and the tyramides with a HRP-quenching step between antibodies using H2O2.

    Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.