Express Five™ 培养基中的 High Five™ 细胞
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Express Five™ 培养基中的 High Five™ 细胞

High Five™ 细胞 (BTI-TN-5B1-4) 是来自于亲本粉纹夜蛾细胞系(粉纹夜蛾卵巢)的克隆分离株,通常用于使用杆状病毒表达载体系统 (BEVS) 进行的重组蛋白表达。High了解更多信息
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B855023 x 10^6 个细胞
货号 B85502
价格(CNY)
19,523.00
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数量:
3 x 10^6 个细胞
价格(CNY)
19,523.00
Each
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High Five™ 细胞 (BTI-TN-5B1-4) 是来自于亲本粉纹夜蛾细胞系(粉纹夜蛾卵巢)的克隆分离株,通常用于使用杆状病毒表达载体系统 (BEVS) 进行的重组蛋白表达。High Five™ 昆虫细胞可以适应 Express Five™ SFM 中的无血清培养,以获得较高水平细胞生长和重组基因表达。High Five™ 昆虫细胞(冷冻在 Express Five™ SFM 中)具有以下特点:

•多种表达系统的重组蛋白表达
• 分泌性蛋白表达高达 Sf9 细胞的十倍
• 贴壁或悬浮培养时生长良好
• 质量和性能检测

多种表达系统的重组蛋白表达
可使用 BaculoDirect™ 杆状病毒表达系统Bac-to-Bac™ 杆状病毒表达系统InsectDirect™ 表达系统实现 High Five™ 细胞的高水平蛋白表达。

分泌性蛋白表达高达 Sf9 细胞的十倍
High Five™ 细胞是昆虫细胞分泌性蛋白表达的较佳选择。它们可持续以 Sf9 细胞的 5–10 倍水平表达蛋白。

贴壁或悬浮培养时生长良好
对 High Five ™ 细胞进行解冻以进行贴壁培养,形成不规则的单层细胞和的可能很难分离的斑块。Express Five™ SFM 的贴壁生长方案见产品手册。High Five™ 细胞可适应悬浮培养。

质量和性能检测
检测了每批次 High Five ™ 细胞从冷冻保存中复苏后的细胞生长和活力。

警告:请至少于2级生物安全防护措施条件下操作任何具有潜在生物危害性的材料。本品含有二甲亚砜(DMSO),这是一种有害试材。请在操作前浏览材料安全性数据表。请在操作前浏览材料安全性数据表。
仅供科研使用。不可用于人或任何动物的治疗或诊断用途。
规格
推荐培养基Express Five™ SFM(无血清培养基)
池数量3 x 106 cells
产品线High Five™
产品类型High Five 细胞
数量3 x 10^6 个细胞
细胞系High Five™
细胞类型昆虫细胞
种属Trichoplusia ni
Unit SizeEach
内容与储存
High Five 冷冻细胞:
•储存条件:液氮(气相)

Express Five 无血清培养基:
•储存条件:2°–8°C
• 避光储存

L-谷氨酰胺,100X:
• 储存条件:-5 至 -20°C
• 避光储存

常见问题解答 (FAQ)

我在Grace’s加血清昆虫培养基中培育的High Five细胞正处于对数生长期。为何这些High Five细胞形成了大块自由漂浮的细胞团,只有极少的细胞成功贴壁?

看起来这些细胞长得过满了。High Five细胞在有血清存在的条件下生长极为迅速。由于这一培养瓶中没有更多空间供细胞生长,因此请尽快分种这些细胞。我们建议您按照1:15的比例进行分种,并每天观察细胞生长情况。尽管可以加入20倍浓度的肝素,我们还是推荐您使用10 μg/mL这一工作浓度。尝试加入一些FBS(0.1%)10-20分钟,之后进行换液。

当为High Five细胞准备肝素时,你们以何种温度保存肝素溶液?

肝素可保存于室温。肝素通常以10 μg/mL的浓度进行使用,尽管超出20倍的浓度也是可行的。

既然High Five细胞的蛋白表达高于Sf9,我是否应该直接使用High Five细胞尝试开展蛋白表达实验?

我们同时推荐您以High Five和Sf9这两类细胞来小规模尝试蛋白转染生产实验。通常每毫升的Sf9细胞培养物所生成的蛋白产物稍多,因为它们可于3–4 x 10E6个细胞/mL的密度下完成转染。High Five在大于2 x 10E6个细胞/mL的密度下就已完全进入对数生长期,因此它们不宜在高于2 x 10E6个细胞/mL的密度下进行转染。

我应如何富集我的昆虫细胞以增加细胞密度?

如果细胞密度过低,而且已经培养了4-5天,我们推荐您通过100 × g离心5分钟来富集细胞,并将其重悬于新鲜的培养基中。细胞在同一培养基体系中不应滞留超过4-5天,因为这一时间段内细胞会耗尽培养基中的养分,长时间暴露于较高温度下也会导致培养基自身发生降解。当培养时出现大量细胞碎片时,也可对细胞进行离心和富集。

昆虫细胞培养与哺乳动物细胞培养之间的主要区别是什么?

昆虫细胞远比许多哺乳动物细胞系更为脆弱。这些细胞在过度生长和过度分离之后,会比哺乳动物细胞出现更多损伤。在悬浮培养时一定不要让细胞密度超过8 x 10E6细胞/mL或以低于0.5 x 10E6个细胞/mL的密度下生长。昆虫细胞需要略高于哺乳动物细胞的渗透压条件(340 μOsM)。昆虫细胞需要大量的O2,特别是在蛋白表达阶段。昆虫细胞培养基比哺乳动物培养基要酸得多(pH6.0-6.4)。昆虫细胞培养基是基于磷酸缓冲体系的。因此,无需使用CO2来维持pH值。