Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488 蛋白合成检测试剂盒

Click-iT™ Plus OPP Alexa Fluor™ 488 蛋白合成检测试剂盒为使用荧光显微镜检查或高内涵成像检测蛋白合成提供了一种快速、灵敏和无放射性的方法。检测时，在含蛋氨酸的完全培养基中 O-炔丙基嘌呤霉素（O-propargyl-puromycin，以下简称 OPP）有效地整合到新翻译的蛋白质中，并通过快速、高特异性和温和的点击反应与明亮、光稳定的 Alexa Fluor™ 荧光染料结合。

试剂盒的特点包括：

•无需更改培养基—在完整、含蛋氨酸的培养基中操作，无需去除细胞培养基
• 多通路—Click-iT™ Plus 技术可保留 GFP 信号并结合荧光偶联鬼笔环肽
• 无放射性—可替代传统 ³⁵S-蛋氨酸方法
•体内使用—已发表结果证实可在体内使用测定蛋白翻译

此试剂盒含有 O-炔丙基-嘌呤霉素 (OPP)，这是嘌呤霉素的炔烃类似物（也单独提供），以及 Alexa Fluor™ 488 吡啶甲基叠氮化物和进行点击反应的所有必要试剂。可将 OPP 添加到培养细胞中，以在活性蛋白合成期间整合到蛋白质中。添加 Alexa Fluor™ 488 吡啶甲基叠氮化物和点击反应试剂使吡啶甲基叠氮化物染料与 OPP 炔烃之间实现化学选择性连接或“点击”反应，使得可通过成像分析检测经修饰蛋白。

点击反应使用生物正交（生物独特）部分对增殖细胞进行荧光标记，有助于产生低背景和高检测灵敏度。由于反应条件温和，Click-iT™ Plus 分析检测蛋白翻译事件，同时可保存细胞形态、荧光标记鬼笔环肽的结合以及 GFP 的荧光信号。

与传统方法中使用的 ³⁵S-蛋氨酸不同，OPP 不是氨基酸类似物，因此它可以直接添加到完全培养基中的细胞中或者用于测定体内的蛋白合成。

此试剂盒含有标记和检测贴壁细胞样品中新翻译蛋白内掺入 OPP 所需的所有组分。此试剂盒包括足量试剂，每次检测使用 1 mL 反应缓冲液标记 25 片 18 mm × 18 mm 盖玻片。