CellLight™ Null(对照品),BacMam 2.0
CellLight™ Null(对照品),BacMam 2.0
Invitrogen™

CellLight™ Null(对照品),BacMam 2.0

CellLight™ Null 对照品可用作 CellLight™ 荧光蛋白活细胞染色试剂的阴性转导对照。CellLight™ Null 对照品不含哺乳动物启动子和转基因。CellLight™ 试剂将荧光蛋白的实用性和选择性与了解更多信息
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CellLight™ Null 对照品可用作 CellLight™ 荧光蛋白活细胞染色试剂的阴性转导对照。CellLight™ Null 对照品不含哺乳动物启动子和转基因。CellLight™ 试剂将荧光蛋白的实用性和选择性与 BacMam 技术的转导效率相结合,可对活哺乳动物细胞中的细胞器、细胞结构和细胞过程进行清晰准确的染色。它们以即用型方式提供—只需添加、孵育然后成像—可在细胞系、原代细胞、干细胞和神经元中高效表达。

CellLight™ Null 对照品具备以下优点:

• 高效:
对多种哺乳动物细胞系(包括原代细胞、干细胞和神经元)均可实现 >90% 的转导率
• 快速便利:只需将 CellLight™ Null 对照品加入细胞中,过夜孵育,即可评估细胞对于 BacMam 转导的耐受性
•安全:CellLight™ 试剂不会在哺乳动物细胞中复制,未观察到致细胞病变效应,并且适用于 1 级生物安全 (BSL) 处理

CellLight™ 试剂原理
其他 CellLight™ 试剂是信号肽或细胞结构蛋白与首要 emGFP、TagRFP 或 CFP 的融合构建体,能够准确且特异地靶向亚细胞区室和结构。包括细胞骨架、线粒体和分泌小体在内的各种靶标可实现方便的多通路分析、共定位研究以及需要高空间和时间分辨率的动态细胞过程成像。CellLight™ 试剂可耐受甲醛固定,因此兼容固定细胞分析。

BacMam 技术
BacMam 技术基于昆虫病毒(杆状病毒),可在哺乳动物细胞中实现有效的转导和瞬时表达。该杆状病毒经重组后包含具有 CellLight™ 融合构建体的表达组件。

BacMam 2.0 包含可极大程度提高转导效率和表达水平的元件:用于更有效进入细胞的假型衣壳蛋白、增强型 CMV 启动子以及土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件 (WPRE)。

杆状病毒不会在哺乳动物细胞中复制,也没有致细胞病变效应,因此具有出色的安全性。

便利的工作流程
与表达载体不同,BacMam 试剂支持可滴定和可重复的瞬时蛋白表达。无需采用条件苛刻的转染方法或繁琐的克隆。要在敏感细胞(如干细胞、神经元和原代细胞)中实现高效率表达,只需将 CellLight™ 试剂加入细胞完全培养基中,进行孵育,第二天即可成像。或者,也可以在铺板时将 CellLight™ 试剂与细胞混合。

当需要标记多个结构或通路时,较高的共转导效率使得多种 CellLight™ 试剂可以很容易地应用到同一实验中。CellLight™ 试剂也能够耐受甲醛固定,因此兼容基于抗体的固定细胞分析。

瞬时转导细胞通常可表达融合蛋白约 5 天——虽然在分裂缓慢的细胞(如一些原代细胞)中,已经证明可持续表达两周;我们曾经在转导后三周以上对终末分化的神经元进行成像。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
颜色无色
检测方法荧光
染料类型未偶联
发射可见光
适用于(设备)共聚焦显微镜、荧光显微镜
形式液体
产品线CellLight™
数量1 瓶
运输条件湿冰
标签类型未标记
产品类型Null 对照品
Unit SizeEach
内容与储存
在 2°C 至 6°C 下避光储存。切勿冷冻。

常见问题解答 (FAQ)

我采用CellLight 标记试剂处理神经元时,转导效率很低,该如何提高转染效率?

与许多其它细胞相比,神经元转导更为困难。提高转导效率的主要方法是采用更多数量的病毒颗粒标记细胞。对于原代神经元,在铺盘时转导要比已培养细胞转导效果更好。此外,蛋白的表达在神经元中发生较慢,表达高峰通常发生于2-3天后而非转导后16小时。

How can I increase the transduction efficiency with the BacMam 2.0 reagents such as the the CellLight and Premo products?

Try varying particle-to-cell ratio (PPC), incubation volume, temperature and, cell density (if adherent cells are transduced). For adherent cells, we recommend a confluence of about 70%. Following the PPC, adjusting the volume is the next best parameter to change to optimize protein expression. If that doesn't work, you can also use the BacMam Enhancer Kit (Cat. No. B10107).

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.

Is there any way to preserve the CellLights labeling beyond 5 days?

Cells transduced with the CellLights reagents can be stored frozen for several months after transduction, without loss of expression.

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Are the CellLights products toxic to cells?

If the viral particles are used at the level we recommend, they are very well tolerated by cells.

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For how long will the CellLights products label my cells?

The BacMam 2.0 CellLights typically express for 5 days after transduction.

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