葡聚糖、四甲基罗丹明和生物素,10,000 MW,赖氨酸可固定 (mini-Ruby)
葡聚糖、四甲基罗丹明和生物素,10,000 MW,赖氨酸可固定 (mini-Ruby)
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葡聚糖、四甲基罗丹明和生物素,10,000 MW,赖氨酸可固定 (mini-Ruby)

标记的葡聚糖是最常用于显微镜研究的亲水多糖,用于监测细胞分裂、追踪活细胞的移动并报告细胞质基质的流体动力学特性。标记的葡聚糖通常通过显微注射进入细胞。是否需要不同的发射光谱或更长时间的追踪?查看我们的其他哺乳动物细胞追踪产品。葡聚糖规格:•标记 (Ex/Em):四甲基罗丹明 & 生物素 (555/580)•大小:10,000 MW•电荷:阴离子•可固定:通过赖氨酸可固定Molecular了解更多信息
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标记的葡聚糖是最常用于显微镜研究的亲水多糖,用于监测细胞分裂、追踪活细胞的移动并报告细胞质基质的流体动力学特性。标记的葡聚糖通常通过显微注射进入细胞。

是否需要不同的发射光谱或更长时间的追踪?查看我们的其他哺乳动物细胞追踪产品

葡聚糖规格

标记 (Ex/Em):四甲基罗丹明 & 生物素 (555/580)
大小:10,000 MW
电荷:阴离子
可固定:通过赖氨酸可固定

Molecular Probes™ 葡聚糖的高生产标准
我们在若干分子量范围内提供超过 50 种荧光和生物素化葡聚糖偶联物。葡聚糖是亲水性多糖,特征为具有中等至较高分子量,水溶性良好,毒性较低。它们通常也表现出低免疫原性。由于它们较不常见的聚-(α-D-1,6-葡萄糖) 连接(使它们能够耐受大多数内源性细胞糖苷酶的切割),葡聚糖具有生物惰性。

在大多数情况下,与其他来源的葡聚糖相比,Molecular Probes™ 荧光葡聚糖更明亮且负电荷更高。此外,我们使用严格的方法尽可能去除未偶联的染料,然后通过薄层色谱分析测定葡聚糖偶联物,以确保不存在低分子量污染物。

广泛的取代基和分子量选择范围
Molecular Probes™ 葡聚糖偶联到生物素或各种荧光基团,包括我们的 7 种 Alexa Fluor™ 染料(Molecular Probes 葡聚糖偶联物–表 14.4),提供以下标称分子量 (MW) 进行选择:3,000;10,000;40,000;70,000;500,000;2,000,000 道尔顿。

葡聚糖净电荷和固定能力
我们利用染料与葡聚糖分子的琥珀酰亚胺偶联,这在大多数情况下会产生中性或阴离子葡聚糖。用于产生 Rhodamine Green™ 和 Alexa Fluor 488 葡聚糖的反应可产生中性、阴离子或阳离子最终产物。Alexa Fluor、Cascade Blue、荧光黄、荧光素和 Oregon Green 葡聚糖本质为阴离子,而大多数用两性离子罗丹明 B、四甲基罗丹明和 Texas Red™ 染料标记的葡聚糖基本为中性。为产生更多的高度阴离子葡聚糖,我们利用专利程序向葡聚糖载体添加了负电荷基团;这些产物为指定的 “聚阴离子”葡聚糖。

某些应用需要用甲醛或戊二醛处理葡聚糖示踪剂,以便用于后续分析。对于这些应用,我们提供大多数荧光基团或生物素葡聚糖偶联物的 “赖氨酸可固定” 版本。这些葡聚糖具有共价结合的赖氨酸残基,允许葡聚糖示踪剂通过醛介导的固定与周围生物分子结合,通过免疫组织化学和超微结构技术进行后续检测。我们还证明我们所有的 10,000 MW Alexa Fluor 葡聚糖偶联物均可用醛类固定剂固定。

使用标记的葡聚糖的关键应用
有一系列引用文献描述了标记葡聚糖的用途。一些最常见的用途包括:

活细胞中的神经元示踪(顺行和逆行)
活细胞中细胞谱系的示踪
神经解剖示踪
检查细胞间通讯(例如,间隙连接、伤口愈合过程以及胚胎发育期间)
研究血管可透过性和血脑屏障的完整性
追踪内吞作用
监测酸化(一些葡聚糖–染料偶联物具有 pH 值敏感性)
研究细胞质基质的流体动力学特性

仅供研究使用。不得用于任何动物或人类的治疗或诊断。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
标签或染料经典染料
产品类型葡聚糖
数量10 mg
运输条件室温
激发/发射555/580 nm
产品线Invitrogen
Unit SizeEach
内容与储存
储存在冰箱(-5 至 -30°C)中并避光。

常见问题解答 (FAQ)

当我注入荧光葡聚糖时,无法看见神经元的详细结构,如何改善以更好地显示详细的结构?

如果您想看到最精细的结构,应使用低分子量葡聚糖偶联物,例如3,000 MW葡聚糖偶联物。

为什么在固定后,荧光偶联葡聚糖信号没有保留下来?

请确保您使用的是葡聚糖是可固定形式(即包含伯胺)。不包含伯胺的葡聚糖将无法固定。另一个原因可能是葡聚糖的浓度过低,其使用浓度可以增加到10 mg/mL。

为什么在我用甲醇固定细胞之后,神经元示踪剂信号全部丢失了?

如果您选择的示踪剂是亲脂性染料并且用甲醇固定,脂质会随着甲醇流失。如果您使用甲醇固定,可以选择能够共价结合神经元内的蛋白质的示踪剂。

我用DiI一类的亲脂性花青染料进行细胞染色,但是当我试图继续用抗体标记时信号却丢失了。 这是什么原因所致?

由于这些染料插入脂质膜,任何对膜的破坏都将导致染料流失。这包括用Triton X-100之类的去垢剂或是甲醇之类的有机溶剂通透。通透是胞内抗体标记所必需的,但它会导致染料流失。相反,CFDA SE之类活性染料能够共价连接到细胞组分,因此可以在固定和通透之后更好的保留。

我用DiI标记我的神经元,然后固定和通透,但没有获得信号。 哪个环节出了问题?

DiI是一种亲脂性染料,多数保留在细胞脂质内。当细胞经去垢剂通透或是用乙醇固定时,会去除掉脂质和染料。如果需要通透,可以使用CM-DiI标记,因为CM-DiI会共价结合膜里面的蛋白;部分信号会随着固定/通透丢失,但残留的信号仍足以被检测出。

引用和文献 (22)

引用和文献
Abstract
Versatile, high-resolution anterograde labeling of vagal efferent projections with dextran amines.
Authors:Walter GC, Phillips RJ, Baronowsky EA, Powley TL,
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:19056424
'None of the anterograde tracers used to label and investigate vagal preganglionic neurons projecting to the viscera has proved optimal for routine and extensive labeling of autonomic terminal fields. To identify an alternative tracer protocol, the present experiment evaluated whether dextran conjugates, which have produced superior results in the CNS, ... More
Astrocytes and microglial cells incorporate degenerating fibers following entorhinal lesion: a light, confocal, and electron microscopical study using a phagocytosis-dependent labeling technique.
Authors:Bechmann I, Nitsch R
Journal:Glia
PubMed ID:9179599
'Entorhinal lesion leads to anterograde degeneration of perforant path fibers in their main termination zone in the outer molecular layers of the dentate gyrus. Concomitantly, astrocytes become hypertrophic, and microglial cells alter their phenotype, suggesting participation in anterograde degeneration. This study analyzes the involvement of these lesion-induced activated glial cells ... More
Tracing of the entorhinal-hippocampal pathway in vitro.
Authors:Kluge A, Hailer NP, Horvath TL, Bechmann I, Nitsch R
Journal:Hippocampus
PubMed ID:9519887
'In vitro tract tracing allowing for continuous observation of the perforant path is a crucial prerequisite for experimental studies on the entorhinal-hippocampal interaction in an organotypic slice culture containing the entorhinal cortex, the perforant path, and the dentate gyrus (OEHSC). We prepared horizontal slices of the temporal entorhinal-hippocampal region of ... More
Persistent neuronal labeling by retrograde fluorescent tracers: a comparison between Fast Blue, Fluoro-Gold and various dextran conjugates.
Authors:Novikova L, Novikov L, Kellerth JO
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:9210570
'The permanence of retrograde neuronal labeling by the fluorescent tracers Fast Blue, Fluoro-Gold, Mini-Ruby, Fluoro-Ruby and Fluoro-Emerald was investigated in adult rat spinal motorneurons at 1, 4, 12 and 24 weeks after tracer application to a transected muscle nerve. After 1 week, the largest number of retrogradely labeled motoneurons was ... More
The use of Lucifer Yellow and Mini-Ruby for intracellular staining in fixed brain tissue: methodological considerations evaluated in rat and human autopsy brains.
Authors:Ohm TG, Diekmann S
Journal:J Neurosci Methods
PubMed ID:7534362
The quality of intracellular filling of Mini-Ruby (MR) is comparable to that of Lucifer Yellow (LY) in both perfusion-fixed rat and immersion-fixed autopsy human tissue. In adult human brain, the use of MR avoids the co-conversion of the typical intracellular lipofuscin deposits as is invariably the case during the photoconversion ... More