葡聚糖、四甲基罗丹明和生物素,10,000 MW,赖氨酸可固定 (mini-Ruby)
葡聚糖、四甲基罗丹明和生物素,10,000 MW,赖氨酸可固定 (mini-Ruby)
Invitrogen™

葡聚糖、四甲基罗丹明和生物素,10,000 MW,赖氨酸可固定 (mini-Ruby)

标记的葡聚糖是最常用于显微镜研究的亲水多糖,用于监测细胞分裂、追踪活细胞的移动并报告细胞质基质的流体动力学特性。标记的葡聚糖通常通过显微注射进入细胞。是否需要不同的发射光谱或更长时间的追踪?查看我们的其他哺乳动物细胞追踪产品。葡聚糖规格:•标记 (Ex/Em):四甲基罗丹明 & 生物素 (555/580)•大小:10,000 MW•电荷:阴离子•可固定:通过赖氨酸可固定Molecular了解更多信息
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D331210 mg
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标记的葡聚糖是最常用于显微镜研究的亲水多糖,用于监测细胞分裂、追踪活细胞的移动并报告细胞质基质的流体动力学特性。标记的葡聚糖通常通过显微注射进入细胞。

是否需要不同的发射光谱或更长时间的追踪?查看我们的其他哺乳动物细胞追踪产品

葡聚糖规格

标记 (Ex/Em):四甲基罗丹明 & 生物素 (555/580)
大小:10,000 MW
电荷:阴离子
可固定:通过赖氨酸可固定

Molecular Probes™ 葡聚糖的高生产标准
我们在若干分子量范围内提供超过 50 种荧光和生物素化葡聚糖偶联物。葡聚糖是亲水性多糖,特征为具有中等至较高分子量,水溶性良好,毒性较低。它们通常也表现出低免疫原性。由于它们较不常见的聚-(α-D-1,6-葡萄糖) 连接(使它们能够耐受大多数内源性细胞糖苷酶的切割),葡聚糖具有生物惰性。

在大多数情况下,与其他来源的葡聚糖相比,Molecular Probes™ 荧光葡聚糖更明亮且负电荷更高。此外,我们使用严格的方法尽可能去除未偶联的染料,然后通过薄层色谱分析测定葡聚糖偶联物,以确保不存在低分子量污染物。

广泛的取代基和分子量选择范围
Molecular Probes™ 葡聚糖偶联到生物素或各种荧光基团,包括我们的 7 种 Alexa Fluor™ 染料(Molecular Probes 葡聚糖偶联物–表 14.4),提供以下标称分子量 (MW) 进行选择:3,000;10,000;40,000;70,000;500,000;2,000,000 道尔顿。

葡聚糖净电荷和固定能力
我们利用染料与葡聚糖分子的琥珀酰亚胺偶联,这在大多数情况下会产生中性或阴离子葡聚糖。用于产生 Rhodamine Green™ 和 Alexa Fluor 488 葡聚糖的反应可产生中性、阴离子或阳离子最终产物。Alexa Fluor、Cascade Blue、荧光黄、荧光素和 Oregon Green 葡聚糖本质为阴离子,而大多数用两性离子罗丹明 B、四甲基罗丹明和 Texas Red™ 染料标记的葡聚糖基本为中性。为产生更多的高度阴离子葡聚糖,我们利用专利程序向葡聚糖载体添加了负电荷基团;这些产物为指定的 “聚阴离子”葡聚糖。

某些应用需要用甲醛或戊二醛处理葡聚糖示踪剂,以便用于后续分析。对于这些应用,我们提供大多数荧光基团或生物素葡聚糖偶联物的 “赖氨酸可固定” 版本。这些葡聚糖具有共价结合的赖氨酸残基,允许葡聚糖示踪剂通过醛介导的固定与周围生物分子结合,通过免疫组织化学和超微结构技术进行后续检测。我们还证明我们所有的 10,000 MW Alexa Fluor 葡聚糖偶联物均可用醛类固定剂固定。

使用标记的葡聚糖的关键应用
有一系列引用文献描述了标记葡聚糖的用途。一些最常见的用途包括:

活细胞中的神经元示踪(顺行和逆行)
活细胞中细胞谱系的示踪
神经解剖示踪
检查细胞间通讯(例如,间隙连接、伤口愈合过程以及胚胎发育期间)
研究血管可透过性和血脑屏障的完整性
追踪内吞作用
监测酸化(一些葡聚糖–染料偶联物具有 pH 值敏感性)
研究细胞质基质的流体动力学特性

仅供研究使用。不得用于任何动物或人类的治疗或诊断。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
标签或染料经典染料
产品类型葡聚糖
数量10 mg
运输条件室温
激发/发射555/580 nm
产品线Invitrogen™
Unit SizeEach
内容与储存
储存在冰箱(-5 至 -30°C)中并避光。

常见问题解答 (FAQ)

当我注入荧光葡聚糖时,无法看见神经元的详细结构,如何改善以更好地显示详细的结构?

如果您想看到最精细的结构,应使用低分子量葡聚糖偶联物,例如3,000 MW葡聚糖偶联物。

为什么在固定后,荧光偶联葡聚糖信号没有保留下来?

请确保您使用的是葡聚糖是可固定形式(即包含伯胺)。不包含伯胺的葡聚糖将无法固定。另一个原因可能是葡聚糖的浓度过低,其使用浓度可以增加到10 mg/mL。

为什么在我用甲醇固定细胞之后,神经元示踪剂信号全部丢失了?

如果您选择的示踪剂是亲脂性染料并且用甲醇固定,脂质会随着甲醇流失。如果您使用甲醇固定,可以选择能够共价结合神经元内的蛋白质的示踪剂。

我用DiI一类的亲脂性花青染料进行细胞染色,但是当我试图继续用抗体标记时信号却丢失了。 这是什么原因所致?

由于这些染料插入脂质膜,任何对膜的破坏都将导致染料流失。这包括用Triton X-100之类的去垢剂或是甲醇之类的有机溶剂通透。通透是胞内抗体标记所必需的,但它会导致染料流失。相反,CFDA SE之类活性染料能够共价连接到细胞组分,因此可以在固定和通透之后更好的保留。

我用DiI标记我的神经元,然后固定和通透,但没有获得信号。 哪个环节出了问题?

DiI是一种亲脂性染料,多数保留在细胞脂质内。当细胞经去垢剂通透或是用乙醇固定时,会去除掉脂质和染料。如果需要通透,可以使用CM-DiI标记,因为CM-DiI会共价结合膜里面的蛋白;部分信号会随着固定/通透丢失,但残留的信号仍足以被检测出。