Search
如果使用我们的FluoVolt 膜电势试剂盒(货号F10488),该试剂盒包含一种背景抑制剂,可改善这一问题。对于其他指标剂,可以考虑使用BackDrop 背景抑制剂(货号R37603、B10511和B10512)。
如果您选择的示踪剂是亲脂性染料并且用甲醇固定,脂质会随着甲醇流失。如果您使用甲醇固定,可以选择能够共价结合神经元内的蛋白质的示踪剂。
由于这些染料插入脂质膜,任何对膜的破坏都将导致染料流失。这包括用Triton X-100之类的去垢剂或是甲醇之类的有机溶剂通透。通透是胞内抗体标记所必需的,但它会导致染料流失。相反,CFDA SE之类活性染料能够共价连接到细胞组分,因此可以在固定和通透之后更好的保留。
DiI是一种亲脂性染料,多数保留在细胞脂质内。当细胞经去垢剂通透或是用乙醇固定时,会去除掉脂质和染料。如果需要通透,可以使用CM-DiI标记,因为CM-DiI会共价结合膜里面的蛋白;部分信号会随着固定/通透丢失,但残留的信号仍足以被检测出。
在周围电场的作用下结构变化的分子可用作检测瞬时(毫秒级)电位变化的快反应探针。慢反应染料则会进入去极化细胞,结合蛋白或膜。增强去极化会造成额外的染料流入,增强荧光强度;过极化的特征则是荧光强度下降。快反应探针通常用于完整心脏组织的电位活动成像,或测量药理刺激引起的膜电位变化。慢反应探针常用于探索线粒体功能和细胞活力。