PureLink™ HiPure 质粒过滤中提试剂盒

吸光值测定经常遇到的一个问题是样本的浑浊度。（这可能是由于纯化柱内的树脂残留引起的。）如果在比色皿内有不溶物（经常是肉眼不可见的），大部分的UV光将不被吸收而是被散射，导致出现一个假性的高UV吸收值（例如在260或280 nm）。如果你的A260很高，我们建议你检测A320以确定是否在样本内存在树脂。你也可以试试离心或过滤（使用0.2 µm滤膜）你的样本以去除残留的树脂然后重新测定浓度。

是的，我们推荐购买PureLink HiPure BAC缓冲液试剂盒（Cat. No. K210018）。你需要加入的RNase量将少于该试剂盒内R3缓冲液瓶上标明的RNase量。瓶上标明加入5.6mL的RNase A。这对于BAC纯化实验是正确的量，但是，如果你进行的是标准质粒提取，那么应加入1.4 mL RNase A。

HiPure试剂盒可以从DNA中去除包括内源性核酸酶在内的所有蛋白。对于硅膜法的PureLink Quick Plasmid Miniprep试剂盒，我们建议使用洗涤缓冲液W10进行一步额外的洗涤步骤以去除内源性核酸酶。这一溶液与HiPure系统不兼容，不能用于HiPure试剂盒。此外，可以将洗脱后的溶于TE中的DNA在70°C加热10分钟。这样做可以使任何污染的核酸酶发生热失活。

当质粒DNA出现切口和/或永久变性时，就会有额外的条带出现。在电泳时，带有切口（共价键断裂）的质粒DNA比超螺旋DNA的迁移速率慢。少量的此种类型的DNA存在是正常的而且并不影响下游应用。永久变性的DNA比超螺旋质粒迁移更快并且可能不适合下游应用。确保裂解反应不能超过5分钟。

我们有时会观察到这种现象。这些颗粒不会影响DNA的质量。这些颗粒可以通过在12,000 x g离心1分钟去除。