PureLink™ HiPure 质粒 FP（过滤柱和沉淀剂）大提试剂盒

PureLink™ HiPure 质粒 FP（过滤柱和沉淀剂）大提试剂盒可在不到 1 小时内从细胞沉淀分离质粒 DNA 得到超纯 DNA。使用试剂盒中提供的 HiPure 过滤柱和 HiPure 沉淀剂，可以纯化质粒 DNA 而无需进行传统分离方案中的离心步骤。纯化的质粒 DNA 的质量等同于通过两次氯化铯梯度（最严格的 DNA 纯化方法）获得的质量，使得其适合转染和其他需要高纯度质粒 DNA 的应用。PureLink™ HiPure 质粒 FP 大提试剂盒（表 1）提供：
•方案简单 - 无需离心即可进行细菌裂解液澄清和异丙醇沉淀
• 快速获得结果 - 从大肠杆菌细胞沉淀获得高纯度、转染级质粒 DNA 仅需约 60 分钟
•高产量 - 高拷贝质粒产量高达 850 μg

工作原理
PureLink™ HiPure 质粒 FP 大提试剂盒采用碱裂解法，无需离心即可制备并快速澄清细菌裂解液（图 1）。独特的 HiPure 过滤柱包括整合至阴离子交换柱中的裂解液滤芯，用于单步裂解液澄清和质粒 DNA 结合。使用单次洗涤去除 RNA、蛋白和其他污染物等杂质，并用高盐缓冲液洗脱超纯质粒 DNA。为了沉淀 DNA 并使之脱盐，向洗脱后的 DNA 中加入异丙醇，然后使用大注射器将混合物加到 HiPure 沉淀剂中。在随后的洗涤和干燥步骤后，用 TE 缓冲液或水从 HiPure 沉淀剂中轻松洗脱质粒 DNA。使用沉淀剂无需离心，降低了在上清液去除过程中损失 DNA 沉淀的风险并节省了时间。所得 DNA 可直接用于具有挑战性的应用。整个方案（从大肠杆菌细胞沉淀中收获超纯转染级质粒 DNA）可在约 1 小时内完成。

较高产量和即用型浓度
HiPure 沉淀剂经过优化后可以较低的洗脱体积（低至500 μl）产生高浓度 DNA，产量无明显降低。事实上，高浓度下的产量始终比竞争试剂盒高（图 2）。可调整产量和浓度以满足下游应用的需求。