Zero Blunt™ TOPO™ PCR 克隆试剂盒，含 pCR™-Blunt II-TOPO™ 载体、One Shot™ TOP10 化学感受态大肠杆菌和 PureLink™ 快速质粒小提试剂盒

两个载体的骨架非常相似。主要的不同在于pCR4-TOPO载体测序引物位点距离PCR产物插入位点仅33 bp。这使得对插入序列进行测序时需要读取的载体序列能最小化，从而使pCR4-TOPO载体非常适合进行测序应用。

两个载体的骨架非常相似。主要的不同在于pCRII-TOPO 载体是一个双启动子载体，包含SP6和T7启动子用于体外转录/测序，而 pCR2.1-TOPO仅包含T7启动子用于体外转录/测序。两个载体均含有M13 正向和反向引物位点用于测序或PCR检测。

对照模板的序列是受专利保护的。

不，你不能用pCR-Blunt 或pCR-Blunt-TOPO载体克隆使用Taq DNA聚合酶扩增而来的PCR产物。 pCR-Blunt载体被制备为平末端以接受平末端片段。因为Taq DNA聚合酶的末端转移活性，该酶产生的PCR产物带有3’-A突起。为了将这些PCR产物克隆进pCR-Blunt，你需要将它们的末端抹平（这通常是一个低效的过程）。我们的TA Cloning试剂盒或TOPO TA Cloning试剂盒对于克隆Taq酶生成的PCR产物来说是更好的选择。 TA Cloning试剂盒包含带有3’-T突起的线性化载体用于高效连接Taq酶生成的PCR产物，无需额外操作。

1. 是的，TOPO TA Cloning 和Zero Blunt cloning vectors可以用于体外转录。这些载体含有的T7、SP6 或T3启动子是活跃的噬菌体启动子，相应的聚合酶将从这些启动子转录RNA。

2. 这些载体通常不建议用于体外翻译，因为这些载体的启动子下游（3’端）大多含有一个或多个翻译起始信号（ATG）。ATG在多克隆位点之内，这可能会干扰在插入片段中开放阅读框的翻译。