该 BLOCK-iT™ U6 RNAi 入门载体提供了用于克隆短发夹 RNA (shRNA) 序列的简单的简化方法，以便检测瞬时转染中的 RNA 干扰 (RNAi)，是分析基因下调调节的首选技术。简单的克隆方法会在启动 U6 pol III 型启动子之后立即启动 ∼50-bp 寡核苷酸 DNA 的反应（图1）。该 RNAi 盒的表达在细胞中形成 shRNA 分子，其将经过加工并作为会产生 RNAi 效应的短干扰 RNA (siRNA)。

交付 U6 RNAi 盒
完成克隆后，U6 入门载体可立即用于使用 Lipofectamine™ 2000 等试剂进行的瞬时转染。这使得该系统适用于在许多哺乳动物细胞类型中进行初始 shRNA 筛选。作为难转染或非分裂细胞类型的替代物或传递到动物模型系统的替代物，RNAi 组织盒可以轻松地重组到 BLOCK-iT™ 病毒 RNAi 载体中。为获得稳定的 shRNA 慢病毒递送和表达，将 BLOCK-iT™ U6 入门载体与 pLenti6/BLOCK-iT™ RNAi 载体重组。若要瞬时传递至挑战细胞类型（使用腺病毒转导），请将 pAd/BLOCK-iT™ RNAi 载体重组。