Bac-N-Blue™ 转染试剂盒
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Invitrogen™

Bac-N-Blue™ 转染试剂盒

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货号数量
K85501
又称 K855-01
5 transfections
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价格(CNY)
13,847.00
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Bac-N-Blue™ 线性 DNA 专为与 pBlueBac 载体和 pMelBac 重组而设计。重组病毒具有全长、功能性 lacZ
基因,可产生蓝色斑块。这便于鉴别和纯化。Bac-N-Blue™ DNA 可与基于多角体蛋白启动子的任何杆状病毒转移载体配合使用。Bac-N-Blue™ DNA
在三个位点进行线性化,其中一个位于对病毒增殖至关重要的基因中 (1)。这导致非重组病毒的减少,使得重组病毒的选择和纯化变得简单。除病毒 DNA 外,Bac-N-Blue™ 转染试剂盒还含有 Cellfectin™ 试剂,可实现高转染效率。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
产品类型昆虫细胞转染试剂盒
数量5 transfections
载体pBlueBac
克隆方法限制性内切酶/MCS
产品线Bac-N-Blue™
促进剂多角体蛋白
蛋白标记未标记
Unit SizeEach
内容与储存
Bac-N-Blue™ 转染试剂盒含有 5 x 0.5 µg 样品瓶装 Bac-NBlue™ 线性病毒 DNA 和 125 µL Cellfectin™ 试剂。
在 +4°C 下储存。妥善储存时,所有组分可保证稳定储存 6 个月。

常见问题解答 (FAQ)

白色菌落不能在液体培养基中生长。我该怎么办?

庆大霉素浓度可能过高。尝试降低庆大霉素的浓度至5 µg/mL,并在培养基中加入更多菌落。

为什么会出现蓝色菌落?为什么会出现中心为蓝色而边缘为白色的菌落?

若出现蓝色菌落,则大肠杆菌含有杆粒和质粒,使细胞能在筛选过程中存活。但是,由于未发生转座,所以LacZ基因未被破坏。靶心菌落表示在菌落生长时发生转座。将从混合克隆白色部分中分离得到的克隆重新划线,应该能够得到发生过转座的菌落。

我得到的主要是白色/野生型空斑,而不是蓝色/重组型空斑。哪里出错了?

这是同源性重组较差的典型标志。应检查使用的质粒/线性DNA比例。但是,如果存在一些蓝色空斑,则对那些病毒进行扩增并检测它们的蛋白。根据我们的经验,它们应该是正确的,即使其丰度相对较低。

感染细胞后,我在一个细胞中看到较大的多角体,而在相邻细胞中看到较小的多角体(数量更多)。这正常吗?

是的,细胞被单个野生型病毒感染后,会以不同速度生成多角体,直到培养瓶中所有的细胞都被感染。细胞中多角体的形成需要3-4天左右,其大小和数量各不相同,直至达到最大能力并发生细胞破裂,从而将微小的病毒颗粒释放到培养基中。

我担心得不到空斑。出现空斑需要几天?空斑通常为多大?

正常情况下,约5-7天会出现很小的白点,约10天出现1 mm空斑。空斑的大小范围为1 mm至4 mm。