pEF6/V5-His TOPO™ TA 表达试剂盒。

我们不建议将感受态细胞保存在液氮中，因为极端温度会损害细胞。另外，装感受态细胞的塑料管子可能承受不了如此低的温度，从而发生破裂。

我们推荐将感受态细胞存储在-80摄氏度。高于这个温度，即使存储时间很短，也会显著降低其转化效率。

未含。不过，您可于离心后通过肉眼观察管底沉积的MembranePro病毒颗粒。您也可通过受体-配体结合研究来测试MembranePro病毒颗粒的功能。 

我们提供了MembranePro功能性蛋白表达系统，来用于哺乳动物细胞膜表面蛋白——包括G蛋白偶联受体（GPCR）——以水溶性形式的表达和展示。这一系统使用病毒样颗粒来捕捉细胞膜表面的脂筏区域，因为VLP会从细胞的这一区域分泌出来。通过使用这一系统，用户可将内源性或过表达的GPCR及其它细胞膜表面蛋白在其天然环境下捕获和展示，再将其用于下游分析。由于VLP是由细胞完成包装并分泌至培养基中的，因此用户可通过简单地倒出和澄清培养基，再沉淀分离VLP，来实现功能性膜蛋白的分离。相比制备细胞膜组份的操作而言，这一实验能大大节省时间，精力，并降低设备需求。由于VLP能够捕获细胞膜表面的受体富集区，您的GPCR相比细胞膜的粗提操作得到了大幅的富集。

MembranePro功能性蛋白表达系统有两种标准的产品配置：MembranePro功能性蛋白表达试剂盒（Functional Protein Expression Kit，货号A11667），以便利的完整试剂盒形式提供，包含了10次反应的所需的全部试剂；MembranePro功能性蛋白支持试剂盒（Functional Protein Support Kit），包含膜蛋白功能性表达所需的相关试剂，但未含293FT宿主细胞或表达载体克隆模块。MembranePro功能性蛋白支持试剂盒有三种规格：10次，60次或600次反应（货号分别为A11668、A11669、A11670）。

如需在Exp293F细胞中高表达功能性膜蛋白，我们还提供了Expi293 MembranePro 表达系统（货号A25869，A25870），这款产品将Expi293的扩展性/易用性与MembranePro技术整合起来，能够将膜蛋白的表达效率大大提升，进而超出常规贴壁培养的MembranePro功能性蛋白表达系统的表达效率20倍以上。请参见应用说明了解更多详情。

注意：Expi293F细胞（货号A14527）与pEF6 V5 His TOPO表达载体试剂盒（货号K961020）未包含于Expi293 MembranePro表达系统中，因此需单独购买。

保守的Kozak序列为A/G NNATGG，其中的ATG表示起始密码子。ATG周围的核苷酸点突变会影响翻译效率。尽管我们通常情况下都推荐加入一段Kozak保守序列，不过这一操作的必要性还是基于具体的目的基因，一般只需ATG就足以高效地启始翻译过程。最佳的建议是保持cDNA中天然起始位点，除非确定这一位点的功能性不理想。如果从表达的角度来考虑，推荐构建并测试两种载体，一个具有天然的起始位点，另一个具有保守的Kozak序列。通常情况下，所有具有N-融合表达的表达载体都已经包含了一个翻译起始位点。