Lipofectamine™ MessengerMAX™ 转染试剂
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Lipofectamine™ MessengerMAX™ 转染试剂
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Lipofectamine™ MessengerMAX™ 转染试剂

Green features
Lipofectamine™ MessengerMAX mRNA 转染试剂可在神经元及广泛的原代细胞中实现出色的转染效率,从而改善应用结果以及更具生物学相关性的研究。这是因为我们新型的脂质纳米微粒技术经过优化,能够在无使用 DNA 所需的入核步骤的情况下递送较高量的 mRNA。使用以下试剂成功转染更聚预测性的细胞模型:•在神经元和原代细胞类型中表现惊人的转染效率•更快的蛋白表达,无基因组整合风险•切割率高达使用 mRNA了解更多信息
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货号数量
LMRNA0151.5 mL
LMRNA0010.1 mL
LMRNA0030.3 mL
LMRNA0080.75 mL
LMRNA15015 mL
货号 LMRNA015
价格(CNY)
14,458.00
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数量:
1.5 mL
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Lipofectamine™ MessengerMAX mRNA 转染试剂可在神经元及广泛的原代细胞中实现出色的转染效率,从而改善应用结果以及更具生物学相关性的研究。这是因为我们新型的脂质纳米微粒技术经过优化,能够在无使用 DNA 所需的入核步骤的情况下递送较高量的 mRNA。

使用以下试剂成功转染更聚预测性的细胞模型:
•在神经元和原代细胞类型中表现惊人的转染效率
•更快的蛋白表达,无基因组整合风险
•切割率高达使用 mRNA CRISPR 的10倍

在新型基因组编辑应用中实现高转染效率
Lipofectamine™ MessengerMAX™ 试剂有助于增加利用 GeneArt™ CRISPR 核酸酶 mRNA 通过高效转染成功切割和重组的可能性,最终实现基因修饰效率较大化以及简化下游过程。

高效转染难转染细胞
Lipofectamine™ MessengerMAX™ 试剂设计用于转染更高量的 mRNA 到神经元以及广泛类型的难转染原代细胞中。这使得无需电穿孔或病毒,与其他基于脂质的试剂相比,转染效率提高了 >2 倍。

利用 mRNA 转染的优势
转染 mRNA 不需要细胞核摄取,其结果比 DNA 转染更快表达蛋白,因为 mRNA 在细胞质中被翻译。此外,mRNA 不存在基因组整合风险,转染效率也不依赖于细胞周期。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
适用于(应用)转染
环保功能绿色可持续包装
产品线Lipofectamine™
产品类型转染试剂
数量1.5 mL
血清兼容性
运输条件室温
细胞类型已建立的细胞系, 神经元细胞, 干细胞, 原代细胞, 难转染细胞
产品规格6孔板、12孔板、24孔板、48孔板、96孔板、培养瓶
样品类型mRNA
转染技术脂质转染
Unit SizeEach
内容与储存
储存在冰箱 (2–8°C) 中。

常见问题解答 (FAQ)

我正在尝试解决用Lipofectamine Messenger MAX转染试剂转染mRNA操作中遇到的疑难。你们能告诉我一些转染后未见表达的可能原因吗?我们使用的是原代细胞,所以我不确定这些细胞是否自身就很难被转染,还是另有原因。

转染后有一些因素会影响表达,但在逐一排除这些可能性之前,应使用GFP mRNA阳性对照(Tri-Link CleanCap EGFP mRNA, 货号L-7201)和Lipofectamine MessengerMAX mRNA转染试剂来尝试转染实验。 如果这一操作都未获得良好的转染结果,最好尝试使用一种替代的导入方法或换用另一种细胞。不过,如果这一实验获得了可接受的结果,下一步则可尝试使用感兴趣的mRNA和MessengerMAX试剂进行转染。如果此时仍未获得理想的表达水平,则可能是所使用mRNA的问题,故障排除可能需要从此方面出发来考虑。举例来说,一些可能涉及的问题包括:有5’帽吗?有多聚A尾吗?mRNA纯度如何?是否在凝胶电泳中获得了单一条带?DNA模板是否纯净?

我们观察到转染效率随着细胞传代次数不同而发生很大变化。你们有推荐的最佳传代次数吗?

在不同代次间看到转染效率的一些差异很正常。为了将这一差异降到最低,我们推荐使用5-20代的细胞进行转染实验。在每一个转染实验中都包括阳性GFP mRNA对照(Tri-Link CleanCap EGFP mRNA, 货号L-7201)有助于定量确定和跟踪每周转染效率的变化。

我在mRNA转染的过程中发现了某些细胞毒性的存在。你们能就此提供一些降低毒性的建议吗?

考虑在mRNA模板中包括适当的5’UTR和3 & # 146;UTR序列以加强mRNA的稳定性和细胞的接受度。使用MegaClear转录纯化试剂盒纯化的高纯度的体外转录mRNA。确保A260/280的比率在1.8和2.1之间。琼脂糖凝胶电泳检查mRNA质量和大小。在某些情况下,考虑在转录反应中加入化学修饰的核苷酸。可能需要调整细胞数量、mRNA和脂质体的用量。转染当日理想存活细胞密度在70% ~ 90%之间。有关转染优化技巧,请访问:thermofisher.com/transfectionsupport。

我不慎将我的脂质体试剂留在了室温条件下,还能继续使用吗?

可以,我们所有的脂质体转染试剂均能够在室温下稳定保存数月。

在转染mRNA的过程中,细胞是否会将将外源RNA包裹进囊泡从而降低mRNA的转染效果,还是它们会(部分)滞留在胞浆中?如果被包裹进囊泡,进入囊泡的mRNA和留下可用于翻译过程的mRNA百分比数量分别是多少?如果是DNA质粒的话,又会观察到何种情况?

我们并没有观察到细胞在包裹mRNA的脂质体复合物和DNA的脂质体复合物上有任何差别。转染过程包括脂质体与mRNA之间复合物的形成,随后细胞通过内吞作用吸收上述脂质体复合物。这一过程中脂质体会对mRNA起保护作用,同时辅助其脱离内涵体,从而释放进入细胞胞浆中。此时mRNA可即刻由核糖体进行翻译。mRNA本身可通过如mMESSAGE mMACHINE T7 Ultra转录试剂盒一类的体外转录试剂盒进行制备,后者可向mRNA中加入5’端ARCA帽结构和3’端poly(A)尾,从而良好地模拟了内源mRNA。