用于 SEAP（分泌型胎盘碱性磷酸酶）报告基因检测的 NovaBright™ Phospha-Light™ EXP 检测试剂盒

NovaBright™ Phospha-Light™ EXP 检测试剂盒是第二代化学发光报告基因检测方法，用于分泌型胎盘碱性磷酸酶 (SEAP) 或非分泌型胎盘同工酶 (PLAP) 的超灵敏检测。该方法的超灵敏检测动态范围达5个数量级该测定系统使用高性能碱性磷酸酶底物 CSPD™、专有的新一代化学发光增强剂以及专有的可特异性抑制内源性非胎盘型碱性磷酸酶活性的缓冲液系统，其性能超过了前几代化学发光检测方法，同时也大大优于比色法和荧光检测方法。该新试剂盒比其他检测方法操作过程简单得多。该方法为匀质检测，仅需两种溶液，且这两种溶液均为即用型。延长的发光动力学提供了稳定的光信号，增加了信号读取时间的灵活性检测信号直接用化学发光酶标仪测量，不需要使用加样器报告蛋白SEAP分泌到细胞培养基中，可通过对培养基取样检测出。由于 SEAP 是分泌到培养基中的，因此无需细胞裂解。同时，亦可通过裂解细胞检测碱性磷酸酶胎盘型同功酶（PLAP）灵敏的碱性磷酸酶报告基因酶检测方法在许多生命科学研究领域中得到广泛应用，包括基因表达、病毒功能检测、疫苗开发、基因治疗用病毒载体及基因递送方法的开发、体内基因表达监测和新的细胞功能分析。SEAP检测是最简单、也是最快速的转染效率优化方法之一。前几代 NovaBright™ 分泌型胎盘碱性磷酸酶 (SEAP) 报告基因化学发光报告基因检测试剂盒 2.0 广泛用于报告基因检测，以测量已建立的细胞系和转染的原代细胞中的基因表达，包括基因敲低/RNA 干扰读取。该测试方法广泛用于病毒功能检测，包括病毒基因表达检测、病毒复制、病毒融合性、病毒的中和和病毒介导的细胞间融合、以及病毒感染性。使用 SEAP 报告蛋白，通过检测转基因、转染或病毒载体感染的动物血清样本，即可轻松完成体内报告基因检测。NovaBright™ 报告基因检测系统已用于测量转基因或转染的整体动物血清（包括小鼠、大鼠、狨猴、猴子和猪血清以及鸡卵尿囊液）中的 SEAP 水平。最近，开发了小鼠 SEAP 蛋白 (mSEAP) 以提高转基因小鼠中 SEAP 蛋白的稳定性，并且 NovaBright™ SEAP 测定试剂盒已用于 mSEAP 的灵敏检测。除了用在报告基因（基因表达）领域外，该检测系统还可利用SEAP蛋白作为功能性报告基因，用于配体上嵌合了SEAP蛋白的、受体－配体结合反应，蛋白酶介导的蛋白分泌及分泌途径活性的测量。NovaBright™ 测定系统也可用于以非胎盘型碱性磷酸酶为生物标记物的细胞学检测。