通过使用 pHrodo AM Variety Pack,可检测和定量分析细胞内 pH 值,其中包括 pHrodo Red 和 Green AM 指示剂染料,即穿过细胞膜并在非特异性酯酶切割后保留在细胞内空间的荧光探针。
pHrodo AM Variety Pack 包含 pHrodo Red AM 和 pHrodo Green AM 指示剂染料各一小瓶,每瓶含有的试剂量足够对一个 96 孔板进行检测。pHrodo Red AM 与 pHrodo Green AM 细胞内 pH 指示剂是用于检测活细胞内 pH 值的荧光探针。它们在中性 pH 值条件下呈弱荧光,但随着 pH 值的下降荧光亮度显著增强。这些试剂可在 4–9 范围内定量细胞溶质 pH 值,pKa 为 ∼6.5,其中激发/发射波长为 560/585 nm (pHrodo Red) 和 509/533 nm (pHrodo Green)。
pHrodo Red AM 和 pHrodo Green AM 染料均具有光稳定性并适用于多通路实验。pHrodo Red 易于与多种蓝色、绿色及远红色染料和报告基因(如 GFP、Fuo-4、钙黄绿素、NucBlue、CellEvent Caspase 3/7 green、Mitosox Green 和 Mitotracker Deep Red 等)配合使用进行多通路检测。pHrodo Green 染料易于与多种蓝色、红色和远红色染料报告基因(如 Mitosox Red、CellEvent Caspase 3/7 Red、NucBlue、RFP 和 Mitotracker Deep Red 等)配合使用进行多通路检测。pHrodo Red 和 pHrodo Green 染料经 AM 酯基团修饰,可产生一种能渗透细胞膜的不带电分子。一旦进入细胞,亲脂性封闭基团被非特异性酯酶切割,导致化合物保留在细胞内空间内。这时探针的荧光强度可指示细胞内的 pH 值。随后使用细胞内 pH 校准缓冲液试剂盒(货号 P35379)可以定量细胞内 pH 值。
pHrodo Red AM 和 pHrodo Green AM 细胞内 pH 值指示剂与多种平台兼容,例如传统荧光显微镜检查、高内涵筛选 (HCS)、流式细胞分析和基于微孔板的荧光测定或高通量筛选 (HTS)。这些试剂也与宽视野或共聚焦荧光显微镜、流式细胞分析仪、荧光酶标仪和高内涵分析仪兼容。
For Research Use Only. Not for human or animal therapeutic or diagnostic use.