我该怎样去除混合了DAPI的ProLong Antifade Mountant、ProLong Diamond Antifade Mountant和ProLong Diamond Antifade Mountant抗淬灭封片剂中的气泡?
有以下两种方法来去除气泡:
1.吸取少量你们要使用的ProLong 抗淬灭封片剂(少许过量)于离心管中。盖上盖子并置于离心机中离心(转速7, 000到13,000 rpm)。此时气泡会移动到样品顶部,通过移液枪/枪头即可移去气泡。
2.拧松ProLong 抗淬灭封片剂的瓶盖,但不要打开。将整瓶/管放入真空瓶中,使用抽气龙头(抽气龙头T型管)。打开真空(水随龙头流走)并对混合液抽真空10到20分钟。
为了避免在样品中形成气泡或去除气泡:
1.吸取适量的ProLong 抗淬灭封片剂封片之前可以将吸取体积调高一点。吹打混合液时不要把全部液体都吸上来,枪和枪头向上离开瓶子的时候体积不要满。这样做可以防止气泡进入枪头。
2.使用盖玻片时出现气泡:当把盖玻片放于ProLong 抗淬灭封片剂上封固时,将盖玻片抬起一个小角度后再轻轻放下。如果盖玻片离样品平面过近或是放下过快,都有可能出现气泡。
3.组织中出现气泡:组织切片,尤其是冰冻切片的一个问题是,空气往往会困于切片中或切片下。在封固时没有发现气泡,但是随着封片剂变硬,对样品轻微的挤压就会放出其中的空气。这使得切片中形成部分微小气泡,封于封固剂中。为了避免这种情况,封固之前先进行脱气。将切片浸没在缓冲液或封闭液中,然后放入真空泵上抽真空。这样就会把切片上的空气和缓冲液抽去。将切片从脱气缓冲液中移出然后封固。
4.如果ProLong抗淬灭封片剂封固样品时快要凝固但是出现了气泡,你们可以把玻片放入PBS中(装有PBS的Coplin jar或Petri dish)。ProLong抗淬灭封片剂会膨胀而盖玻片会滑落,或者你们也可以用手轻轻移开盖玻片。你们可以用新的小份的ProLong 抗淬灭封片剂重新封固。
1.吸取少量你们要使用的ProLong 抗淬灭封片剂(少许过量)于离心管中。盖上盖子并置于离心机中离心(转速7, 000到13,000 rpm)。此时气泡会移动到样品顶部,通过移液枪/枪头即可移去气泡。
2.拧松ProLong 抗淬灭封片剂的瓶盖,但不要打开。将整瓶/管放入真空瓶中,使用抽气龙头(抽气龙头T型管)。打开真空(水随龙头流走)并对混合液抽真空10到20分钟。
为了避免在样品中形成气泡或去除气泡:
1.吸取适量的ProLong 抗淬灭封片剂封片之前可以将吸取体积调高一点。吹打混合液时不要把全部液体都吸上来,枪和枪头向上离开瓶子的时候体积不要满。这样做可以防止气泡进入枪头。
2.使用盖玻片时出现气泡:当把盖玻片放于ProLong 抗淬灭封片剂上封固时,将盖玻片抬起一个小角度后再轻轻放下。如果盖玻片离样品平面过近或是放下过快,都有可能出现气泡。
3.组织中出现气泡:组织切片,尤其是冰冻切片的一个问题是,空气往往会困于切片中或切片下。在封固时没有发现气泡,但是随着封片剂变硬,对样品轻微的挤压就会放出其中的空气。这使得切片中形成部分微小气泡,封于封固剂中。为了避免这种情况,封固之前先进行脱气。将切片浸没在缓冲液或封闭液中,然后放入真空泵上抽真空。这样就会把切片上的空气和缓冲液抽去。将切片从脱气缓冲液中移出然后封固。
4.如果ProLong抗淬灭封片剂封固样品时快要凝固但是出现了气泡,你们可以把玻片放入PBS中(装有PBS的Coplin jar或Petri dish)。ProLong抗淬灭封片剂会膨胀而盖玻片会滑落,或者你们也可以用手轻轻移开盖玻片。你们可以用新的小份的ProLong 抗淬灭封片剂重新封固。