SBFI, AM,细胞可透过性 - 特殊包装
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SBFI, AM,细胞可透过性 - 特殊包装

SBFI 是一种钠敏感分子,用于测定分离线粒体中 Na+ 梯度、细胞内 NA+ 水平、细胞中 Na+ 外排,还可与其他荧光指示剂结合使用,以将细胞内了解更多信息
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S126420 x 50 μg
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价格(CNY)
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SBFI 是一种钠敏感分子,用于测定分离线粒体中 Na+ 梯度、细胞内 NA+ 水平、细胞中 Na+ 外排,还可与其他荧光指示剂结合使用,以将细胞内 Na+ 的变化与 Ca2+ 和 Mg2+ 浓度、细胞内 pH 和膜电位关联起来。尽管 SBFI 对 Na+ 的选择性低于钙指示剂(如 fura-2),但在存在其他单价阳离子的情况下,其足以检测生理浓度的 Na+。SBFI 与离子结合后的光谱响应允许进行激发比测量,该指示剂可与用于 Fura-2 的相同光学滤光片和设备配合使用。

了解更多有关离子指示剂(包括钙、钾、pH 值和膜电位指示剂)的信息›

荧光离子指示剂规格:
• 标记(激发/发射波长):SBFI (∼340,380/500 nm)
• 冻干产品可以溶解在 DMSO 中,以供使用
•通常,通过向含细胞的培养基中添加溶解指示剂将产品上样至细胞中


选择性注意事项和细胞上样策略
在不存在 Na+ 的情况下,SBFI 针对 Na+ 的解离常数 (Kd) 为 3.8 mM,在 Na+ 和 K+ 合计浓度为 135 mM(接近生理离子强度)的溶液中,该值为 11.3 mM。SBFI 对 Na+ 的选择性为 K+ 的 ∼18 倍。

SBFI 有不可渗透细胞的酸盐 (S1262) 和可渗透细胞的乙酰氧基甲基 (AM) 酯(S1263S1264)两种规格。可使用我们的 Influx™ 胞饮细胞上样试剂(I14402螯合物、校准缓冲液、离子载体和细胞上样试剂—第 19.8 节)或通过显微注射、膜片移液管输注或电穿孔将阴离子酸形式上样至细胞中。对于 AM 酯上样(细胞内离子指示剂的上样和校准—注释 19.1),通常需要添加 Pluronic™ F-127 (P3000MP, P6866, P6867) 或 PowerLoad™ (P10020) 分散剂,以及相对较长的孵育时间—长达 4 小时—。

查找 Na+ 和 K+ 的荧光指示剂
我们提供了许多用于测量 Na+ 和 K+ 的荧光指示剂。有关这些产品的更多信息,请查看 Molecular Probes™ 手册中的荧光 Na+ 和 K+ 指示剂—第 21.1 节

供研究使用。不可用于人或动物的治疗或诊断。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
检测方法荧光
染料类型钠指示剂
数量20 x 50 μg
运输条件室温
适用于(应用)细胞活力与增殖
适用于(设备)荧光显微镜
产品类型SBFI AM
Unit SizeEach
内容与储存
在冷冻冰箱(-5°C 至 -30°C)中避光储存。

常见问题解答 (FAQ)

为什么我看不到活细胞荧光指示剂信号有明显变化?

不管何种活细胞指示剂染料(如钙指示剂,pH指示剂,金属离子指示剂),请务必确保上样过程中无血清,否则血清会过早地切割带有AM酯基的染料并非特异性结合染料。在检测样品之前,请使用阳性对照优化染料浓度和染色时间来得到最佳的信号与背景比值。做阳性对照时缓冲液一定要包含已知浓度的自由离子和用于打开离子通道的离子载体(例如Fluo-4 AM一类的钙指示剂,它包括缓冲液中加入钙与卡西霉素,又比如pH指示剂,不同pH值的缓冲液与尼日利亚霉素相结合)。类似于CellROX Green 或H2DCFDA需要一个细胞活性氧(ROS)刺激作为阳性对照,例如甲萘醌。最后,确保成像系统具有灵敏的探测器。例如相对于显微镜或流式细胞仪,读板仪检测信号和背景差异的能力就比较低。

Why don't I see a significant change in signal for my live-cell fluorescent indicator dye?

Regardless of the type of live-cell indicator dye (e.g., calcium indicators, pH indicator, metal ion indicators), make sure there is no serum during the loading step, which can prematurely cleave dyes with AM esters and bind dyes non-specifically. Always optimize the dye concentration and staining time with a positive control before you run your test samples, to give the best signal-to-background. Always run a positive control with a buffer containing free ions of known concentration and an ionophore to open pores to those ions (for instance, for calcium indicators like Fluo-4 AM, this would include a buffer with added calcium combined with calcimycin, or for pH indicators, buffers of different pHs combined with nigericin). Reactive oxygen indicators, such as CellROX Green or H2DCFDA would require a cellular reactive oxygen species (ROS) stimulant as a positive control, such as menadione. Finally, make sure your imaging system has a sensitive detector. Plate readers, for instance, have much lower detector efficiency over background, compared to microscopy or flow cytometry.

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Cell Analysis Support Center.