pSecTag2 A、B 和 C 哺乳动物表达载体

如果目的基因的起始密码子位于一个完整的Kozak序列中，就有可能优先于载体的起始密码子被翻译出来，导致该蛋白缺乏引导序列或未被糖基化，因此无法准确定位于内质网及被分泌出来。这一情况比较罕见，但的确发生过。如果是这一原因，我们推荐您使用PCR的方法来删除起始密码子。

pSectag2载体含有用于大肠杆菌筛选的Zeocin抗生素抗性基因，任意一种包含完整Tn5转座子元件的大肠杆菌菌株（即DH5αF’IQ，SURE，SURE2）都会编码ble（博来霉素）抗性基因，从而能够耐受Zeocin抗生素。因此，如需实现最高效的筛选操作，我们强烈推荐使用不含Tn5基因的大肠杆菌菌株。

可以，您可在大肠杆菌中通过Zeocin抗性来进行筛选。不过，请切记如需激活Zeocin抗性，培养基中的盐浓度必须维持在较低水平（<90 mM），pH值须为7.5。请使用低盐（5 g NaCl/L）LB来制备LB培养基和LB琼脂平板。 

这些载体之间的差别仅在于pSecTag2载体包含了用于进行稳转筛选的Zeocin抗生素抗性基因，而pSecTag2/Hygro载体则包含了用于进行稳转筛选的潮霉素B抗性基因。

您可向目的基因的上游插入一个N端分泌信号或引导肽（同一读码框中），来促进蛋白的分泌表达。我们提供pSecTag2（货号V90020）和pSecTag2/Hygro（货号V91020）两款产品，来满足此种需求。这些载体的N端均包含了小鼠Ig kappa链分泌信号，用于帮助实现目的蛋白的分泌型表达。