外泌体免疫沉淀试剂(蛋白 G)
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外泌体免疫沉淀试剂(蛋白 G)
Invitrogen™

外泌体免疫沉淀试剂(蛋白 G)

外泌体免疫沉淀试剂(蛋白 G)能够快速、温和地分离外泌体蛋白,对靶蛋白产生较小的物理应力,并允许在同一凝胶上比较多个样品。•保持完整的外泌体蛋白复合物• 显著降低背景—低非特异性结合• 快速方案时间—仅30分钟• 更多比较—超灵敏度允许在同一凝胶上比较多个样品 与蛋白了解更多信息
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外泌体免疫沉淀试剂(蛋白 G)能够快速、温和地分离外泌体蛋白,对靶蛋白产生较小的物理应力,并允许在同一凝胶上比较多个样品。

•保持完整的外泌体蛋白复合物
• 显著降低背景—低非特异性结合
• 快速方案时间—仅30分钟
• 更多比较—超灵敏度允许在同一凝胶上比较多个样品

与蛋白 A 偶联的 Dynabeads™ 广泛用于免疫沉淀(IP)、染色质免疫沉淀(ChIP)和蛋白分离。Dynabeads™ 的磁性使其成为用于免疫沉淀的 sepharose 或琼脂糖浆的优异替代品,因为磁分离技术比其他方法更快、更温和,对靶蛋白产生较小的物理应力。这允许分离和浓缩不稳定的复合物,否则在长时间孵育期间可能会被蛋白酶解离或被其破坏。将保留天然蛋白质构象和完整的大蛋白复合物。

外泌体免疫沉淀(蛋白 G)利用 Dynabeads™ 蛋白 G 进行抗体结合和随后的外泌体蛋白的免疫沉淀。将抗体加入到 Dynabeads™ 悬浮液中,其中通过抗体的 Fc 区发生结合。然后将混合物置于磁力架附近,使微珠迁移到管子的侧面,从而轻松地除去上清液。微珠结合抗体现在可用于外泌体蛋白的免疫沉淀。在蛋白分析(如 Western 印迹)前,免疫沉淀使外泌体蛋白浓缩 10 至 50 倍。

通过外泌体免疫沉淀(蛋白 G)捕获的 Ig 数量取决于起始样品中 Ig 的浓度。结合能力约为每毫升微珠 240 µg 人 Ig。

为了通过蛋白 A 分离 Ig,我们推荐使用外泌体免疫沉淀(蛋白 A)

仅供科研使用。不可用于人或动物的治疗或诊断。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
最终产品类型蛋白质复合物、蛋白质(天然)
产品规格悬浮磁珠
高通量能力不兼容高通量应用(手动)
分离技术磁珠
配基类型蛋白 G
产品线Dynabeads
数量1 mL
样品类型外泌小体
运输条件室温
目标种属所有物种
直径(公制)2.8 μm
产品类型外泌体免疫沉淀试剂
Unit SizeEach
内容与储存
储存于 2 至 8°C。

常见问题解答 (FAQ)

你们能否提供一些应用Dynabeads磁珠分离外泌小体的参考文献或相关引用?

可以。请参见此海报(https://tools.thermofisher.com/content/sfs/posters/Exosome-poster-ISEV-2013-Boston.pdf)。

此外,这里还有一些相关引用:
•Blood 91:2573 (1998)
•Science 289:444 (2000)
•J Physiol 537:537 (2001)
•Mol Cell Proteomics 12:587 (2013)
•Biol Reprod 81:717 (2009)

凭借不同的膜表面标志物分离出的外泌小体之间会存在差异么?

是的,基于不同的膜表面标志物所分离外泌小体中的蛋白表达谱之间会有明显差异。这一结论由Tauro等(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23230278)的研究证实,该研究团队基于EpCAM或A33这两种膜表面标志物,从人癌细胞系的条件培养基中分离出两群明显不同的外泌小体。蛋白组学研究结果显示这两群外泌小体是独特的。

我希望使用Dynabeads磁珠来分离外泌小体,你们推荐何种产品?

我们拥有多款外泌小体分离试剂盒,包括外泌小体—人源CD63(货号10606D),外泌小体—人源CD9(货号10614D),外泌小体—人源CD81(货号10616D)和外泌小体—人源EpCAM,适用于凭借这些常用的外泌小体膜表面抗原来实现外泌小体分离操作。如果您希望使用您的自备抗体通过其他特异性膜表面标志物来分离外泌小体,您也可使用我们的Dynabeads外泌小体免疫沉淀(ProteinA,货号10610D),Dynabeads外泌小体免疫沉淀(ProteinG,货号10612D)或用于分离/检测的外泌小体—链霉亲和素产品(货号10608D)。此外,用户也可选用抗小鼠IgG的Dynabeads磁珠(货号11031或11033)和识别特定膜表面标志物的小鼠单抗来实现外泌小体分离操作。

如何鉴定外泌小体?

一般通过流式细胞仪(使用CD9、CD63、TSG101和Alix等膜表面标志物)来鉴定外泌小体,通过EM来研究其形态和尺寸,或凭借LC-MS/MS来实现更为详细的蛋白分析。

分离外泌小体的常用膜表面标志物有哪些?

这些标志物要基于外泌小体的细胞来源进行选择。最常用于外泌小体分离和鉴定的膜表面标志物为CD9、CD63、CD81或TSG101。下表列举了一些最近用于鉴定或分离外泌小体的参考文献和膜表面标志物:

膜表面标志物

参考文献
Alix, CD63, EpiCam, HSP70, TSG101
Mol Cell Proteomics 12:587 (2013)

CD9, CD63
Hum Mol Genet 21:R125 (2012)

CD63, MHC II
J Biol Chem 278:52347 (2003)

CD9, CD81, Lamp1, TSG101
Cancer Res 67:7458 (2007)

CD63
Nature Cell Biol 9:654 (2007)

Alix, CD37, CD53, CD63, CD81, CD82, TSG101
J Cell Biol 200:373 (2013)

CD59, CD63, CD133, TSG101
FASEB J 23:1858 (2009)