AccuPrime™ Pfx DNA 聚合酶
AccuPrime&trade; <i>Pfx </i>DNA 聚合酶
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AccuPrime™ Pfx DNA 聚合酶

AccuPrime™ Pfx DNA 聚合酶非常适用于克隆和诱变等下游应用的 DNA 片段高保真扩增。通过专有的酶制备方法实现高保真度,该酶含有来自带校正读码(3´→5´ 核酸外切酶)活性的高温球菌属了解更多信息
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AccuPrime™ Pfx DNA 聚合酶非常适用于克隆和诱变等下游应用的 DNA 片段高保真扩增。通过专有的酶制备方法实现高保真度,该酶含有来自带校正读码(3´→5´ 核酸外切酶)活性的高温球菌属 KOD 的重组 DNA 聚合酶。Platinum™ 抗Pfx DNA 聚合酶抗体可抑制聚合酶活性,提供热启动性能,从而提高 PCR 特异性(见图)。耐热 AccuPrime™ 辅助蛋白在每个 PCR 循环中可增强特异性引物模板杂交,与单独的 Platinum™ Pfx 相比,能提高特异性、产量和稳健性。使用 AccuPrime™ PfxDNA 聚合酶,您将:

•实现比 Taq DNA 聚合酶高出26倍之多的保真度
• 将片段扩增至 12 kb
• 尽量减少 PCR 优化应用
从复杂基因组、病毒和质粒模板扩增 DNA;以及 RT-PCR。AccuPrime™ Pfx DNA 聚合酶在需要极高保真度的情况下特别有效。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
保真度(相对于 Taq)26 X
热启动内置热启动
反应次数1000 次反应
突出端平末端
聚合酶AccuPrime Pfx DNA 聚合酶
数量1000 次反应
反应形式分离组分
运输条件湿冰或干冰
尺寸(最终产品)12 kb 或更小
容量500 μL
检测方法引物-探针
适用于(应用)Hot-start PCR, High-fidelity PCR
高 GC PCR 扩增效果
反应速度标准
Unit SizeEach
内容与储存
• 1 x 500 μL AccuPrime Pfx DNA 聚合酶 (2.5 U/μL)
• 5 x 1 mL 10X AccuPrime Pfx 反应混合物
• 2 x 1 mL 50 mM MgSO4

在 -20°C 下储存。

常见问题解答 (FAQ)

当我用凝胶电泳检测时,我的寡核苷酸似乎没有显示出正确长度。这是为什么?

寡核苷酸应该在含有7M尿素的聚丙烯酰胺凝胶上检测,并且应该与50%的甲酰胺溶液一起上样以避免压缩和形成二级结构。长度相同但是组成不同的寡核苷酸可以产生不同的电泳结果。dC的迁移最快,其次是dA、dT,最慢的是dG。带有核糖核酸的寡核苷酸容易产生模糊的电泳条带,并且通常存在二级结构问题。

我所使用的引物刚开始时可以用来做PCR的,但是随着时间的推移它失效了。这是什么情况?

在进行PCR之前应将引物按单次使用的量分装。将分装的引物在94度下加热1分钟。在加入PCR反应体系前快速在冰上冷却引物。有些引物可能会自己退火或者自己蜷缩起来。

在我定制的寡核苷酸管中没有看到沉淀。我是否应该要求换货?

引物的干燥方法会使其附在管壁上形成一个薄层而不是附在底部,因此并不是总能看到沉淀,这种情况下产品仍可以正常使用。

在我的寡核苷酸管子底部有球状的沉淀。这是什么?我的寡核苷酸还能再用吗?

如果寡核苷酸受热过度,它看上去就像一个“球”状沉淀附在管子的底部。这应该不会影响到寡核苷酸的质量,并且该寡核苷酸应该是易溶于水的。

我的冻干寡核苷酸是绿色的。还能再用吗?

如果寡核苷酸看上去是绿色的,最有可能是墨水落入离心管中。该寡核苷酸应仍然是具有功能的。您可通过乙醇沉淀法去除该颜色。

引用和文献 (1)

引用和文献
Abstract
Recombination-based DNA assembly and mutagenesis methods for metabolic engineering.
Authors:Liang X, Peng L, Tsvetanova B, Li K, Yang JP, Ho T, Shirley J, Xu L, Potter J, Kudlicki W, Peterson T, Katzen F
Journal:Methods Mol Biol
PubMed ID:22144356
'In recent years there has been a growing interest in the precise and concerted assembly of multiple DNA fragments of diverse sizes, including chromosomes, and the fine tuning of gene expression levels and protein activity. Commercial DNA assembly solutions have not been conceived to support the cloning of very large ... More