Recovery™ 细胞培养冻存培养基

一般细胞培养的各种生长培养基都可以与Recovery细胞冻存培养基兼容。尽管有其他方案可以替代（这也需要最后用户决定），我们推荐您在接种前移除Recovery 细胞培养冷冻培养基。

Recovery细胞冻存培养基在2到8°C条件下应该可以稳定存放一周，但我们并没有数据支持此结论。

目前还没有任何实验数据。最好小份分装这种产品。

不可以，不能使用冻存的组织。

当从Thermo Fisher Scientific购买了Gibco或Invitrogen冻存或正处于增殖期的细胞，可对其进行扩增和重新冻存。不过，冻存操作可能会对细胞的生长状态有所影响。下列实验方案为您提供了一份使用Synth-a-Freeze培养基冻存细胞的基础指南，Synth-a-Freeze培养基是Thermo Fisher Scientific旗下的一款成分确定，无蛋白成份的冻存培养基。
请注意：由于冻存设备与个人技术之间的差异，我们无法保使用本方案冻存的细胞在复苏后能够保持活力，我们也无法为研究用户实验室冻存细胞的效果进行担保。
1. 使用37°C水浴化冻Synth-a-Freeze培养基(https://www.thermofisher.com/order/catalog/product/A1254201)或4°C条件下过夜化冻。
2. 如果在水浴中进行化冻，请确保温度不要超过37°C，也勿将该产品延长时间置于37°C。
3. Synth-a-Freeze培养基在使用前应置于4°C条件下彻底平衡。为获得最优结果，推荐客户使用能够控制变温速率的冰箱。如果缺少能够控制变温速率的冰箱，也可使用细胞冻存盒（如Thermo Scientific Mr Frosty container)。
4. 如需用酶试剂解离培养器皿表面的细胞，则需使用对应的终止溶液重悬细胞以中和酶的效果。
5. 通过离心沉淀细胞。
6. 去除上清液后，使用预冷的Synth-a-Freeze培养基以5x10E5至3x10E6细胞/毫升的密度重悬细胞。
7. 将细胞悬液分装至合适数量的冻存管中。
8. 将细胞尽快冷却至4°C。
9. 如果使用控制变温速率的冰箱：以每分钟降低1°C的速率冰冻样品，直至–40°C。之后按照每分钟降低2°C的速率降至–90°C左右。
10. 如果使用细胞冻存盒：请按照说明书来准备冻存盒。
为获得最佳结果，我们推荐您在细胞温度降至–80°C后，尽快将冻存管转移至液氮储存设备的气相中。
作为Synth-a-Freeze培养基的替代品，可使用该冻存细胞推荐的基础培养基，添加10%胎牛血清（FBS）和10% DMSO进行细胞冻存。请注意不推荐将Synth-a-Freeze培养基用于人表皮黑素细胞的冻存操作。