Stealth RNAi™ siRNA 阴性对照,Med GC
Stealth RNAi™ siRNA 阴性对照,Med GC
Invitrogen™

Stealth RNAi™ siRNA 阴性对照,Med GC

Stealth™ RNAi siRNA 阴性对照品 Med GC 是三种阴性对照品中的一种,与 Stealth™ siRNA 实验配合使用了解更多信息
Have Questions?
货号数量
12935300250 μL
货号 12935300
价格(CNY)
3,346.00
Each
添加至购物车
数量:
250 μL
价格(CNY)
3,346.00
Each
添加至购物车
Stealth™ RNAi siRNA 阴性对照品 Med GC 是三种阴性对照品中的一种,与 Stealth™ siRNA 实验配合使用。这些对照是测定实验所用的 Stealth™ RNAi siRNA 双链体在背景基础上的作用的好方法。Stealth— RNAi siRNA 阴性对照试剂盒含有所有三种对照品(低、中和高 GC 含量™不含序列 #2 和 #3),各对照品也可单独提供。这些对照:

•设计为 3 种 GC 含量水平(低、中、高),且可提供每个水平的 3 个序列,以便研究人员能够将 GC 含量与其实验 Stealth™ RNAi siRNA 相匹配
•与脊椎动物转录组中的所有序列均不同源
•测试证明不会诱导应激反应

关于 Stealth™ RNAi siRNA 阴性对照品
Stealth™ RNAi 阴性对照双通路适用于 RNA 干扰 (RNAi) 实验,可作为任何脊椎动物细胞系中 Stealth™ RNAi 传递后序列不相关效应的对照。每个 Stealth™ RNAi 阴性对照双通路设计用于尽可能减少与任何已知脊椎动物转录本的序列同源性。Stealth™ RNAi 阴性对照双通路在 GC 含量上彼此不同,并以即用型规格提供。如果需要,包括 1X RNA 退火/稀释缓冲液,用于稀释 Stealth™ RNAi 储备液。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
适用于(应用)RNAi,转染
标签或染料未偶联
产品线Stealth RNAi™ siRNA
产品类型siRNA
数量250 μL
控制类型阴性对照品
RNAi 类型siRNA
Unit SizeEach
内容与储存
包含一管 250 µL Stealth™ RNAi 阴性对照双链体 (20 µM) 和一管 1 mL 1X RNA 退火/稀释缓冲液。在 -20°C 下储存。

常见问题解答 (FAQ)

使用载体介导的RNAi技术有什么优势?

载体介导的技术使您能够:

•实现瞬时或稳定的靶点敲低
•在所有细胞类型中实现RNAi,甚至是难转染、原代和不分裂细胞
•通过siRNA的诱导表达,调控基因抑制效应
•可以筛选稳定表达某个siRNA序列的单一细胞群
•利用组织特异性启动子控制体内基因表达

我的细胞为何在转染后快要死了?

我们建议进行一个转染试剂对照实验,确定您的细胞是否对转染试剂敏感。此外,您可以尝试其他细胞密度和siRNA浓度以减少转染本身的毒性。

我转染了siRNA并且mRNA水平降低了,但是蛋白水平没有降低,这是什么原因所致?

在一些情况下,即使mRNA已经被敲低,蛋白的敲低效果也会受蛋白降解速率等其他变量的影响。另外,相比于mRNA,蛋白可能需要更长的时间才能看到敲低效果。

我的目的基因没有被敲低,可能的原因有哪些?

请参考以下可能的原因和建议:

•您测试了多少个siRNA?有任何敲低效果吗?如果所有siRNA都没有敲低效果(<10%),那么可能是检测方法本身的问题。试试使用其他qRT-PCR assay评估敲低效果。
•qRT-PCRassay的靶位点和siRNA切割位点的相对位置如何?如果两者相差3,000碱基以上,问题可能是其它剪接转录本的存在造成的。
•实验的Ct值是多少?在40循环的qRT-PCR实验中它们应该低于35。
•您确定siRNA转染进入细胞中了吗?我们建议使用一个经过验证的阳性对照siRNA来检查转染效率。

我的siRNA没有获得任何基因敲低效果,对此您有何建议?

请参考以下可能的原因和建议:

•是检测的mRNA水平吗?最可靠的方法是实时PCR。在一些情况下,即使mRNA已经被敲低,蛋白的敲低效果也可能会受蛋白降解速率等其它变量的影响。
•RNA是如何提取的?检测提取的RNA的质量了吗?应确保RNA没有降解。
•使用阳性对照了吗?这可以帮助确定试剂是否有效以及siRNA是否被正确递送进细胞。请在进行实验的同时使用阳性对照siRNA。
•使用转染对照了吗?被转染细胞的百分比是多少?
•进行不同时间的检测了吗?通常,基因沉默可以早在转染后24小时测定。但是,基因敲低的持续时间和程度取决于所用的细胞类型和siRNA的浓度。
•优化过转染条件吗?您可以尝试使用不同的细胞密度和siRNA浓度。
•您使用了多大浓度的siRNA?我们建议测试 5 nM到100 nM之间的多个浓度。