Product Image
Thermo Scientific™

Dynabeads™ MyOne™ 羧酸,仅适用于 OEM 和工业用途

亲水性 Dynabeads™,直径 1 µm,含有羧酸基团。这些表面基团可以共价连接核酸、蛋白⁄多肽以及其他配体的伯胺基或者伯巯基,形成酰胺键。反应时需要在低温下进行迅速并温和的混合,需要中性或酸性的pH值,并且需要用碳二亚胺活化。可以使用市售交联剂引入替代反应基团。液相行为与磁珠的超顺磁性的结合,为包被、分离及分析物的洗涤过程提供了快速的反应动力学基础了解更多信息
Have Questions?
货号数量
35401100 mL
货号 35401
价格(CNY)
-
数量:
100 mL
亲水性 Dynabeads™,直径 1 µm,含有羧酸基团。这些表面基团可以共价连接核酸、蛋白⁄多肽以及其他配体的伯胺基或者伯巯基,形成酰胺键。反应时需要在低温下进行迅速并温和的混合,需要中性或酸性的pH值,并且需要用碳二亚胺活化。可以使用市售交联剂引入替代反应基团。

液相行为与磁珠的超顺磁性的结合,为包被、分离及分析物的洗涤过程提供了快速的反应动力学基础。1 µm MyOne™ 磁珠的特征包括表面积大、容量高、易于进行高效磁牵引以及孵育过程中沉淀速率低,使其完美地适用于高通量至关重要的自动化方案。

该产品在可重复性和自动化能力方面遵循有名的 Dynal 标准,能提高分析的可靠性。

优点及特性:

• 微珠尺寸小、容量高
• 高效、可重复的配体固定化
• 生产过程简单、处理方法重复性好
• 极低的聚集
• 与 M-280⁄M-270 微珠相比,沉降速率低但反应动力学有所改善
• 在包被处理、分离和分析物清洗过程中提供快速的反应动力学性能
• 在自动化过程中重复性好且无混合要求

应用:
氨基修饰的寡核苷酸、抗体、蛋白⁄多肽或其他配体固定化。较弱的核酸非特异性结合能力。用于捕获特异性 DNA⁄RNA 序列、靶蛋白或任何其他分析物。

其他信息:
这种特定产品规格适用于需求量大的客户,可按 OEM 方式提供。也适用于小批量终端用户 (货号650.11, 650.12 和 650.13)。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
最大浓度10 mg⁄ml,10 mg⁄ml,10 mg/ml
产品规格悬浮磁珠
高通量能力兼容高通量应用
产品线DYNAL、Dynabeads、MyOne
数量100 mL
运输条件室温
表面功能基团羧酸
直径(公制)1 μm
产品类型羧酸微珠
Unit SizeEach
内容与储存
储存于 2-8°C

常见问题解答 (FAQ)

我的Dynabeads磁珠不能很好地吸附到磁力架上,对此你们有什么建议吗?

请查看以下可能原因:

•溶液太粘稠。
•蛋白质间相互作用导致磁珠聚集。

尝试以下建议:
•延长分离时间(将管子留在磁力架上2-5分钟)。
•向裂解液中加入DNase I(约0.01 mg/mL)。
•将结合和/或清洗缓冲液中的Tween20浓度增加至约0.05%。
•向结合和/或清洗缓冲液中加入最多至20 mM 的β-巯基乙醇。

我想要分离较长的双链DNA片段,你们有什么产品可以推荐?

对于小于1 kb的生物素标记DNA,我们推荐使用Dynabeads M270链霉亲和素磁珠和MyOne C1磁珠。对于大于1kb的双链DNA分子,我们推荐Dynabeads KilobaseBINDER试剂盒。KilobaseBINDER试剂包括M-280链霉亲和素偶联的Dynabeads磁珠和一种含有专利的固定活化剂的结合液,可结合较长的生物素化DNA分子以进行分离。请点击以下链接(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/dna-rna-purification-analysis/napamisc/capture-of-biotinylated-targets/immobilisation-of-long-biotinylated-dna-fragments.html),查看关于长的生物素化DNA片段分离的更多信息。

我能否使用Dynabeads磁珠分离单链DNA模板?

可以,Dynabeads磁珠可用于分离单链DNA。链霉亲和素Dynabeads磁珠能够以生物素化的DNA片段为靶标,通过使双链DNA变性,从而去除非生物素化链。链霉亲和素偶联的Dynabeads磁珠不会抑制任何酶活性。因此,可以在固相上直接对磁珠结合的DNA进行下一步处理。请点击以下链接(https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/dna-rna-purification-analysis/napamisc/capture-of-biotinylated-targets/preparing-single-stranded-dna-templates.html),查看关于单链DNA捕获的更多信息。

什么是磁化率?

磁化率能够衡量磁珠向磁力架迁移的速度,其大小取决于铁含量和氧化铁的特性。Dynabeads磁珠的磁化率是指质量磁化率,单位可以是cgs单位/g或m^3/kg(国际单位制)。对于亚铁磁性和铁磁性物质,质量磁化率取决于磁场强度(H),这些物质的磁化强度与H不是线性关系,而是随着场强增加而趋于饱和。因此, Dynabeads磁珠的质量磁化率是在固定条件下由标准操作程序而测定的。我们产品目录中给出的质量磁化率是国际单位制。磁化率由从高斯(cgs、emu)单位向国际单位的转换,是通过“高斯系数(emu/g或cgs/g)x 4π x 10^-3”而实现的。所得单位也被称为合理化质量磁化率,与(国际单位制)无量纲磁化率单位有所区别。通常,质量磁化率可用来衡量在非均匀磁场中影响物体的力(Fz)。测定Dynabeads磁珠的质量磁化率时,首先对样本称重,然后将样本放置于已知强度的磁场中。随后,再次称重得到样本重量(F1),并与关闭磁场时样本的重量(F0)进行对比。使用下述公式计算磁化率:K x 10^–3 = [(F1-F0) x m x 0.335 x 10^6],K表示质量为m的样本的质量磁化率。最后,将磁化率转换为国际单位制。

我如何确定Dynabeads磁珠的偶联效率?

有多种不同的方法可以检测配体与磁珠结合,包括光密度(OD)检测、荧光标记和放射性标记。

对于OD检测,应在配体固定到磁珠上之前检测配体的OD值,并将其与包被后上清液中剩余的配体浓度进行比较。这样可以粗略检测有多少蛋白与磁珠结合。 实验方案: 1.将分光光度计设置到正确的波长。使用偶联缓冲液作为空白组。 2.检测偶联前溶液的吸光值。根据配体的加入量,可能需要进一步稀释以读取吸光值。 3.检测偶联后溶液的吸光值。也可能需要进一步稀释以读取吸光值。 4.计算偶联效率,以“蛋白质摄取量%”表示,如下所示:[(偶联前溶液的吸光值x D) – (偶联后溶液的吸光值x D)] x 100/(偶联前溶液的吸光值 x D),D = 稀释倍数。 对于荧光标记,我们建议对配体结合量进行反向定量,即检测偶联上清液中剩余的配体量(与原始样本对比),而不是直接检测磁珠上的配体量。将标记的配体加入到磁珠中,并检测上清液中剩余多少配体(而不是结合到磁珠上的配体)。通过与开始时加入的总配体量相比,可以计算出结合到磁珠上的配体量。由于Dynabeads磁珠具有自发荧光,因此,我们不推荐直接检测与磁珠结合的配体的荧光,而是推荐这种间接方法。标记物可以是FITC/PE等。有些研究人员也成功使用了直接检测方法(采用流式细胞仪)。 在3种方法中,放射标记的灵敏度最高,但难度最大。该方法涉及到对配体的一部分进行放射性标记。在偶联前,使用示踪剂量的放射性标记的I-125,将其以一定比例与“冷”配体混合。使用闪烁(γ)计数器对磁珠进行检测,并将磁珠的cpm值与标准品对比,得到磁珠上配体的绝对量。 实验方案: 1.取出适量磁珠,并使用1 mL结合缓冲液清洗。 2.吸取适量人IgG,置于一个单独的管子中。 3.将人IgG与I-125标记的人IgG(30,000–100,000 cpm)混合。 4.使用结合缓冲液将人IgG与I-125标记的人IgG混合物稀释至100mL。 5.室温下孵育30分钟,使用闪烁计数器检测cpm值。 6.清洗磁珠(和包被层)4次,再次检测cpm值。 使用下述方程计算结合率%:(清洗后cpm值/清洗前cpm值)x100%。