Silencer™ Select 人类基因组 siRNA 文库 V4
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Silencer™ Select 人类基因组 siRNA 文库 V4

首先,您可以以一种便利的预铺板文库形式获得 Ambion™Silencer™ Select siRNA 的优势。这些 siRNA 集合支持对由于特定功能类别的大量靶标受到抑制而产生的表型进行中高通量分析。•对于大多数的人基因类别,Ambion™Silencer™ Select了解更多信息
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首先,您可以以一种便利的预铺板文库形式获得 Ambion™Silencer™ Select siRNA 的优势。这些 siRNA 集合支持对由于特定功能类别的大量靶标受到抑制而产生的表型进行中高通量分析。

•对于大多数的人基因类别,Ambion™Silencer™ Select siRNA 集合可直接运输
• 以便利的 384 孔规格提供的三个单独的 siRNA/靶标
• 采用一种全新算法进行设计,该算法可产生更好、更一致的敲低
• 新型化学修饰使脱靶效应降低,降幅高达 90%
• 是目前可用 siRNA 的效力的 100 倍
• 证明了表型结果的一致性和可靠性有所改善

Silencer™ Select siRNA 是什么?
Silencer™ Select siRNA 是下一代 Ambion™ siRNA。这些 siRNA 整合了 siRNA 设计、脱靶效应预测算法和化学修饰等诸多领域较新的进步成果,以产生卓越的效果、效力和特异性的 siRNA。在 siRNA 筛选应用中,结果是由于沉默不良导致的假阴性减少,由于脱靶效应导致的假阳性减少。换句话说,使用 Silencer™ Select siRNA 时,您可从一级筛选中获得更洁净、更一致的数据,这样您就可以花费更少的时间和资源找到真实、经验证的靶标。结果是由于沉默效果较差导致实验失败的情况减少,并获得更洁净、更一致的表型数据。

人类基因组 siRNA 文库
(包括部件号:4397922 + 4397923 + 4397924)
越来越多的研究人员正在进行基因功能的基因组规模调查。Silencer™ Select 人类基因组 siRNA 文库 V4 是此目的的理想选择。为 21,584 个人靶标各提供三种独特的非重叠 siRNA。以该文库“可成药”部分为靶标的 siRNA 按照基因功能分级排列,以便易于筛选激酶、磷酸酶、GPCR 等重要基因亚群。该 siRNA 文库以 384 孔板的形式提供。

人类可成药基因组和人类扩展可成药基因组 siRNA 文库
当 siRNA 以极具治疗相关性的人类基因为靶标,并便利地按靶基因类别进行分组时,Silencer™ Select 人类可成药基因组 siRNA 文库 V4 和 Silencer™ Select 人类扩展可成药基因组 siRNA 文库 V4 是许多研究人员的常用选择。可成药基因组集以 9031 个基因为靶标,而扩展可成药基因组集合以这些基因加上包括转录因子在内的全部 10414 个基因的“扩展集”为靶标。请联系我们获取完整的靶标列表。这些文库有 96 和 384 孔板两种规格。

人激酶 siRNA 文库
因为它们在细胞信号转导和多种生物通路中非常重要,所以激酶是关键药物靶标和密切关注的对象。Silencer™ Select 人激酶 siRNA 文库 V4 以 710 种人激酶为靶标,每个基因有三种单独的 Silencer™ Select siRNA。该 siRNA 文库使得能够对这些关键细胞调节子进行系统但极具性价比的 RNAi 研究。包括经验证的 siRNA(如可用)。以 96 孔板提供 Silencer™ Select 人激酶 siRNA 文库 V4。

人磷酸酶 siRNA 文库
与激酶一样,磷酸酶是生物通路和细胞信号级联的重要调节子。Silencer™ Select 人磷酸酶 siRNA 文库 V4 以 298 种人磷酸酶为靶标,每个基因有三种单独的 siRNA(以 96 孔板的形式提供)。该文库是 Silencer™ Select 激酶 siRNA 文库 V4 的理想配套产品,使得能够进行更详细的生物通路研究。

人 GPCR siRNA 文库
G 蛋白偶联受体(或 GPCR)是许多信号转导通路的关键组分,也是一类重要的可成药基因。Silencer™ Select 人 GPCR siRNA 文库 V4 以 379 种非嗅人 GPCR 为靶标,每个靶标有三种单独的 Silencer™ Select siRNA(以 96 孔板的形式提供)。

人蛋白酶、核激素受体和离子通道 siRNA 文库
将 siRNA 集聚焦于人蛋白酶、离子通道和核激素受体,为研究这些重要的细胞功能调节子提供了一种经济有效的方法。这些 siRNA 文库均以 96 孔板的形式提供。Silencer™ Select 人蛋白酶 siRNA 文库 V4 每个靶标有 3 种 siRNA(494 种人蛋白酶)。Silencer™ Select 人核激素受体 siRNA 文库 V4 包括 3 种 siRNA/靶标(47 种核激素受体)。Silencer™ Select 人离子通道 siRNA 文库 V4 每个靶标有 3 种 siRNA(338 种人离子通道)。

增强数据可靠性的单独 siRNA
Silencer™ Select siRNA 文库每个靶标有 3 种单独 siRNA。每个基因可采用三种 siRNA 进行筛选,显著降低了假阳性和假阴性率,从而提高了 RNAi 筛选数据的可靠性,降低了缺失重要基因的几率并减少了在从筛选中获得假阳性结果所需的时间。

这些文库包含 0.25 nmol 各 siRNA,足以完成 500 次转染(在 5 nM siRNA、100 µL 转染体积下)。将 siRNA 干燥后放入 96 孔板的孔中。每个 96 孔板中的一列留空,以便在使用时添加对照品。文库提供完整的 siRNA 序列信息以及外显子靶向和各靶向基因的符号、完整名称、别名、RefSeq 编号和 Entrez Gene ID 加使用所包含 siRNA 进行任何验证实验的结果。

Silencer™ Select siRNA 文库至这些或任何其他人基因列表也可与 1、2 或 5 nmol 各 siRNA 一起提供。定制规格可用于这些较大的尺寸。如需获取基因列表或其他信息或者与我们的技术专家讨论您的研究,请联系您当地的销售代表或发送电子邮件至 libraries@ambion.com。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
适用于(应用)RNAi
产品线Silencer™, Silencer™ Select, Ambion™
产品类型siRNA 文库
数量1 套
产品规格384 孔板
RNAi 类型siRNA
种属
目标多种靶标
Unit SizeEach
内容与储存
Silencer™ Select 人类基因组 siRNA 文库 V4 (# 4397926) 含以下内容物:- Silencer™ Select 人类基因组 siRNA 扩展装置 V4,384 孔板。(# 4397923) - Silencer™ Select 人类可成药基因组 siRNA 文库 V4,384 孔板。(#4397922) - Silencer™ Select 人类可成药基因组 siRNA 扩展装置 V4,384 孔板。(#4397924) * 请致电客户服务部获取最新内容物信息。(1.800.327.3002) 储存在 –20° 或更低温度的非自动除霜冰箱中。

常见问题解答 (FAQ)

使用载体介导的RNAi技术有什么优势?

载体介导的技术使您能够:

•实现瞬时或稳定的靶点敲低
•在所有细胞类型中实现RNAi,甚至是难转染、原代和不分裂细胞
•通过siRNA的诱导表达,调控基因抑制效应
•可以筛选稳定表达某个siRNA序列的单一细胞群
•利用组织特异性启动子控制体内基因表达

我的细胞为何在转染后快要死了?

我们建议进行一个转染试剂对照实验,确定您的细胞是否对转染试剂敏感。此外,您可以尝试其他细胞密度和siRNA浓度以减少转染本身的毒性。

我转染了siRNA并且mRNA水平降低了,但是蛋白水平没有降低,这是什么原因所致?

在一些情况下,即使mRNA已经被敲低,蛋白的敲低效果也会受蛋白降解速率等其他变量的影响。另外,相比于mRNA,蛋白可能需要更长的时间才能看到敲低效果。

我的目的基因没有被敲低,可能的原因有哪些?

请参考以下可能的原因和建议:

•您测试了多少个siRNA?有任何敲低效果吗?如果所有siRNA都没有敲低效果(<10%),那么可能是检测方法本身的问题。试试使用其他qRT-PCR assay评估敲低效果。
•qRT-PCRassay的靶位点和siRNA切割位点的相对位置如何?如果两者相差3,000碱基以上,问题可能是其它剪接转录本的存在造成的。
•实验的Ct值是多少?在40循环的qRT-PCR实验中它们应该低于35。
•您确定siRNA转染进入细胞中了吗?我们建议使用一个经过验证的阳性对照siRNA来检查转染效率。

我的siRNA没有获得任何基因敲低效果,对此您有何建议?

请参考以下可能的原因和建议:

•是检测的mRNA水平吗?最可靠的方法是实时PCR。在一些情况下,即使mRNA已经被敲低,蛋白的敲低效果也可能会受蛋白降解速率等其它变量的影响。
•RNA是如何提取的?检测提取的RNA的质量了吗?应确保RNA没有降解。
•使用阳性对照了吗?这可以帮助确定试剂是否有效以及siRNA是否被正确递送进细胞。请在进行实验的同时使用阳性对照siRNA。
•使用转染对照了吗?被转染细胞的百分比是多少?
•进行不同时间的检测了吗?通常,基因沉默可以早在转染后24小时测定。但是,基因敲低的持续时间和程度取决于所用的细胞类型和siRNA的浓度。
•优化过转染条件吗?您可以尝试使用不同的细胞密度和siRNA浓度。
•您使用了多大浓度的siRNA?我们建议测试 5 nM到100 nM之间的多个浓度。