BigDye™ Direct 循环测序试剂盒
BigDye™ Direct 循环测序试剂盒
Applied Biosystems™

BigDye™ Direct 循环测序试剂盒

BigDye™ Direct 循环测序试剂盒是 BigDye™ 产品系列的一部分,是用于您的 PCR 和测序需求的全套试剂盒。这一创新性、省时的试剂盒将 PCR了解更多信息
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货号反应次数
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货号 4458688
价格(CNY)
62,925.00
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反应次数:
1000 Reactions
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BigDye™ Direct 循环测序试剂盒是 BigDye™ 产品系列的一部分,是用于您的 PCR 和测序需求的全套试剂盒。这一创新性、省时的试剂盒将 PCR 纯化和循环测序步骤相结合,可简化操作流程、缩短得出实验结果的时间。本试剂盒具有24、100和1000次的反应规格,以满足您的测序通量需求。

BigDye™ Direct 循环测序试剂盒可为您提供以下优势:
•简化的简单程序
•所有测序步骤均在单次反应管中执行
•从基因特异性引物序列之后的第1个碱基开始且分辨率极佳的快速迁移
•与之前的工作流程相比,可节省大量时间

通过独特的简化工作流程节约时间并获得更佳的结果
BigDye™ Direct 循环测序试剂盒开发用于最大程序减小复杂性和手动操作时间。与通常需要5个处理步骤、长达8小时的先前测序程序相比,Big Dye™ Direct 可以4步在约5小时内得出结果 — 节约达 40% 的时间(图1)。

该试剂盒提供了用于测序工作流程的2个关键步骤的试剂:
• PCR 反应 — 使用 BigDye™ Direct PCR 预混液和 M13 加尾引物(不提供);PCR 反应在约1小时内完成。
• 独特的一步式 PCR 纯化循环测序反应 — 使用提供的 BigDye™ Direct 测序预混液和 BigDye™ Direct M13 引物(用于 PCR 反应的 M13 加尾引物通过使用独立于已分析 PCR 产品的2种测序引物简化了测序反应构建)。

单管方案提高置信度
使用 BigDye™ Direct 直接循环测序试剂盒,从 PCR 到上样至到毛细管的步骤都可在同一反应管中进行,无需将材料从一管转移到另一管中。通过尽可能减少手动处理步骤,降低了实验变异性的可能性;因此,您可以对您的数据更有信心。

集成式解决方案是重新测序的理想选择
BigDye™ Direct 循环测序试剂盒是第一款专为保持条件而设计的产品,可用于整个读长范围内高质量的数据生成,与常见测序工作流程相比,运行时间更快。这是通过独特的试剂配方实现的,此配方允许高分辨率地读取更靠近引物的数据和使用 POP-7™ 聚合物(图2)或 SeqStudio 纯化柱,以缩短毛细管电泳时间。BigDye™ Direct 循环测序试剂盒经过优化,可与 Applied Biosystems ™ 基因分析仪和 BigDye XTerminator™ 纯化试剂盒配合使用。
仅供科研使用。不可用于诊断程序。
规格
适用于(应用)比较测序(生殖细胞突变 - 30:70 杂合子)、比较测序(生殖细胞突变 - 50:50)、富含 GC 的测序 (>65%)、富含 GT 或困难模板测序、标准测序、间隙闭合、均聚物 A 或 T、富含 AT 的测序 (>65%)、比较测序(生殖细胞突变 - 10:90 杂合子)
适用于(设备)3130xl 基因分析仪、3730xl DNA 分析仪、GeneAmp 9700、SeqStudio 基因分析仪、Veriti 热循环仪、3130 基因分析仪、3730 DNA 分析仪、3500xL 基因分析仪、3500 基因分析仪
包括BigDye™ Direct Cycle Sequencing Kit, 1000 rxns, 8-well Strips, 96-well Plate, Fluorescent Dye Terminator Sequencing Technique, 3, Use with 130xl Genetic Analyzer, 3500 Genetic Analyzer, 3500xL Genetic Analyzer, 3730 DNA Analyzer, 3730xl DNA Analyzer, GeneAmp™ 9700, Veriti™ Thermal Cycler
反应次数1000 Reactions
产品线BigDye™
产品类型直接循环测序试剂盒
数量1,000 reactions
运输条件干冰
技术荧光染料 Terminator 测序
模板兼容性BAC DNA、Cosmid、λ DNA、PCR 扩增子(10:90杂合子)、质粒 DNA (≤15 kb)、基因组 DNA(细菌)、Fosmid、PCR 扩增子(50:50杂合子)、PCR 扩增子(30:70杂合子)
产品规格8孔联管, 96孔板
Unit SizeEach
内容与储存
该试剂盒含有 BigDye™ 直接 PCR 预混液、测序预混液、M13 正向引物、M13 反向引物和对照 DNA CEPH 1347-02。所有组分均储存在 -15 至 -25°C 下。首次使用后,PCR 预混液应储存在 4°C 下。该试剂盒含有足以进行 1000 次反应的试剂。

常见问题解答 (FAQ)

What do I do if I have pull-up peaks caused by off-scale data when using the BigDye Direct Cycle Sequencing Kit?

We recommended that you perform one of the following:

- Reduce the number of PCR cycles by 2–3 cycles
- Re-inject the affected samples
- Optimize injection parameters by reducing time or voltage

Find additional tips, troubleshooting help, and resources within our Capillary Electrophoresis Applications Support Center.

Do you have any recommendations for the pre-PCR template DNA concentration in the BigDye Direct Cycle Sequencing Kit procedure?

The recommended DNA input amount is 4 ng.

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Am I required to use fresh PCR product with the BigDye Direct Cycle Sequencing Kit, or can I store the PCR reaction before proceeding? What temperature is best for storage?

We always recommended that you use fresh PCR product, but if you need to store it, the amplified PCR reaction can be stored for 16 hours at 4°C or up to 4 weeks at –20°C.

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Can I store samples in BigDye Xterminator solution? If so, what is the optimal temperature, and for how long can I store it?

Yes, after cleaning the sequencing product using the BigDye XTerminator Purification Kit, the end product can be stored up to 10 days at either 4°C or –20°C.

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If I need to pause my experiment in the middle of the BigDye Direct Cycle Sequencing Kit procedure, how long can I expect my samples to be stable?

The amplified PCR reaction can be stored for 16 hours at 4°C or up to 4 weeks at –20°C. The formulated sequencing reaction mix can be stored at ambient temperature for up to 16 hours. After cycle sequencing but before cleanup, the sequencing product can either be stored for up to 16 hours at 4°C or up to 4 weeks at –20°C. After cleaning the sequencing product up using the BigDye XTerminator Purification Kit, the end product can be stored up to 10 days at either 4°C or –20°C.

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