HT ExoSAP-IT™ 高通量 PCR 产物纯化

HT ExoSAP-IT High-Throughput PCR Product Cleanup 是 ExoSAP-IT 试剂的另一配方，专为满足高通量、自动化平台和多通道移液器的独特需求而设计。HT ExoSAP-IT 试剂在高温下的使用寿命更长，且进行自动化移液时粘度更低。

与用于 PCR Product Cleanup 的 ExoSAP-IT (PN 78200) 一样，HT ExoSAP-IT 试剂是由 Exonuclease I 和 Shrimp Alkaline Phosphatase (SAP) 构成的一种混合试剂，可在单次孵育过程中除去 PCR 反应后的过量引物和 dNTP。HT ExoSAP-IT 试剂的热稳定性更高、粘度更低，更便于在自动化 96 孔板和 384 孔板中使用。

•单管 PCR 纯化 — 直接将 HT ExoSAP-IT 试剂添加到 PCR 产物中
•高准确度 —较长的读取长度提供高质量数据
•10% 样品回收的情况 —无论片段大小如何，都可以保证 PCR 产物无损失
•简单、单步骤 —取代使用磁珠或色谱柱时固有的多步骤、浪费时间的问题
•高通量处理 — 低粘度配方允许自动化移液，能够更快地获得结果
•去除多余的引物和 dNTP — 不会干扰下游应用
  –测序
  – SNP 分析
  – 单碱基延伸法
  –片段分析
  – 体外转录
•可扩展 — 处理从 5 微升至 5 L 的反应体积
•便捷包装 — 在 96 孔板中提供 8 联管和 12 联管
•在 +25deg;C 下可拟定保存 8 小时 — 保持完整功能活性，在 45°C 下可稳定保存一周

HT ExoSAP-IT 试剂直接添加到 PCR 产物中，并在 37°C 下孵育 15 分钟。经 PCR 处理后，只需花 15 分钟加热至 80°C 即可将其灭活。我们的高通量配方设计用于自动化移液和多通道移液器。HT ExoSAP-IT 试剂的粘度低于标准混合物，并提供 8 联管规格，易于使用。

HT ExoSAP-IT 试剂使用两种溶于特配缓冲液的水解酶（即 Exonuclease I 和 SAP），可从 PCR 产物中除去不需要的 dNTP 和引物。Exonuclease I 去除 PCR 中产生的残留单链引物和任何无关的单链 DNA。SAP 可从 PCR 混合物中去除剩余的 dNTP。

简单：单步
HT ExoSAP-IT 试剂仅需一个移液步骤和两次孵育。只需将 HT ExoSAP-IT 试剂添加至 PCR 产物中，即可在 30 分钟内完成测序、 SNP 分析、单碱基延伸或片段分析。通过在 96 孔低裙边 PCR 板的单管、8 联管或者 12 联管中使用 HT ExoSAP-IT 试剂，可在一个简单步骤中实现酶法除去过量引物和未结合的核苷酸。这种新的产品形式使其成为配合自动化设备使用的理想产品。

通过 HT ExoSAP-IT 获得出色的准确度
通过 HT ExoSAP-IT 获得极高的数据质量和测序准确度，即使是较长的读取长度也不例外。经 HT ExoSAP-IT 处理的 PCR 产物序列读取长度比使用竞争品牌处理的样品平均多出 50+ 个碱基。使用人基因组 DNA 对 1007 bp 的片段进行测序，未发现识别错误。其他 PCR 纯化方法可能受到的大小限制不再是 HT ExoSAP-IT 的影响因素。经 HT ExoSAP-IT 处理的样品在 970 bp 序列全长范围内的 Phred 20 值为 822 ± 9，而经 Agencourt™ AMPure™ XP 处理的样品仅为 776 ± 83。

无样品损失
使用 HT ExoSAP-IT 无需进行所有凝胶或柱纯化、沉淀、过滤、微珠和/或磁性分离⁽¹⁾。使用 HT ExoSAP-IT 时，短 PCR 产物和长 PCR 产物的回收率均为 100%。

使用 HT ExoSAP-IT 处理的 PCR 产物比较稳定
Ht ExoSAP-IT 试剂经过严格的检测且受到严格的质量控制。将经过 HT ExoSAP-IT 处理的 PCR 产物在 24°C 下储存一周后，未发生产物降解。

参考文献：
1.DUGAN, K. A., LAWRENCE, H. S., HARES, D. R., FISHER, C. L. AND BUDOWLE B. (2002) J. Forensic Sci 47, 811-818.
2.HANKE, M. AND WINK, M. (1994) BioTechniques 17, 858-860.
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4.SILVA, JR., W. A., COSTA, M. C. R., VALENTE, V., DE FREITAS SOUSA, J., PACÓ-LARSON, M. L., ESPREAFICO, E. M., CAMARGO, S. S., MONTEIRO, E., DE JESUS, A., HOLANDA, M. A., ZAGO, M. A., SIMPSON, A. J. G. AND NETO, E. D. (2001) BioTechniques 30, 537-542.
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